Expressão de L-asparaginase de Erwinia chrysanthemi em tecnologia de síntese proteica livre de células

• Processo: 18/15041-8
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de novembro de 2018
• Data de Término da vigência: 30 de setembro de 2020
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Acordo de Cooperação: Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)
• Pesquisador responsável: Gisele Monteiro
• Beneficiário: Guilherme Meira Lima
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências Farmacêuticas (FCF). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 13/08617-7 - Produção de L-asparaginase extracelular: da bioprospecção à engenharia de um biofármaco antileucêmico, AP.TEM
• Bolsa(s) vinculada(s): 19/09354-6 - Evolução dirigida da L-asparaginase para aprimoramento de sua estabilidade in vivo, BE.EP.MS
• Assunto(s): Asparaginase Biotecnologia
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: asparaginase | biotecnologia | cell-free | Biotecnologia Farmacêutica

Resumo

A L-Asparaginase (L-ASNase) é um importante biofármaco utilizado atualmente para o tratamento da leucemia linfoblástica aguda. Por ser um produto biológico de origem bacteriana, extensivas etapas de purificação são imprescindíveis para a obtenção do produto final puro, impactando negativamente nos custos relacionados à sua produção. Novas alternativas mais econômicas e eficientes de obtenção deste bioproduto são portanto necessárias. Neste contexto, propõe-se, a partir deste projeto, a avaliação da capacidade de utilização da tecnologia de síntese proteica livre de células para a obtenção da L-ASNase recombinante de Erwinia chrysanthemi. A tecnologia consiste na utilização de extratos celulares e substratos energéticos capazes de expressar proteínas recombinantes in vitro, dispensando dessa maneira a utilização de células vivas. A tecnologia tem demonstrado alta eficiência de expressão proteica, mostrou-se ser escalonável a diferentes volumes de reação e, por ser um sistema aberto, permite um maior controle do processo e avaliação imediata dos níveis de expressão atingidos. A expressão de L-ASNase nesta tecnologia simplificaria seu processo biotecnológico e facilitaria o estudo e a caracterização de novas formas da enzima, além de contribuir para o aperfeiçoamento e o avanço da tecnologia de síntese proteica livre de células no âmbito da indústria biofarmacêutica.

Publicações científicas

(6)

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

LIMA, GUILHERME M.; ATRAZHEV, ALEXEY; SARKAR, SUSMITA; SOJITRA, MIRAT; REDDY, REVATHI; TORRES-OBREQUE, KARIN; RANGEL-YAGUI, CARLOTA DE OLIVEIRA; MACAULEY, MATTHEW S.; MONTEIRO, GISELE; DERDA, RATMIR. DNA-Encoded Multivalent Display of Chemically Modified Protein Tetramers on Phage: Synthesis and in Vivo Applications. ACS Chemical Biology, DEC 2021. (13/08617-7, 16/22065-5, 18/15041-8, 19/09354-6, 18/15104-0)

LIMA, GUILHERME M.; MENEZES, MILENE C.; COSTA, IRIS M.; SERRANO, SOLANGE M. T.; MONTEIRO, GISELE. Development of a cell-free protein synthesis protocol to rapidly screen L-asparaginase proteoforms by enzymatic activity. JOURNAL OF CHEMICAL TECHNOLOGY AND BIOTECHNOLOGY, JUN 2021. (13/08617-7, 18/15041-8, 16/25896-5, 13/07467-1, 18/15104-0)

LIMA, GUILHERME M.; MENEZES, MILENE C.; COSTA, IRIS M.; SERRANO, SOLANGE M. T.; MONTEIRO, GISELE. Development of a cell-free protein synthesis protocol to rapidly screen L-asparaginase proteoforms by enzymatic activity. JOURNAL OF CHEMICAL TECHNOLOGY AND BIOTECHNOLOGY, v. 96, n. 9, p. 2659-2666, SEP 2021. (18/15041-8, 13/08617-7, 13/07467-1, 18/15104-0, 16/25896-5)

PARIZOTTO, LETICIA DE ALMEIDA; KLEINGESINDS, EDUARDO KREBS; PEDROTTI DA ROSA, LUIZA MANFRINATO; EFFER, BRIAN; LIMA, GUILHERME MEIRA; HERKENHOFF, MARCOS EDGAR; LI, ZHAOPENG; RINAS, URSULA; MONTEIRO, GISELE; PESSOA, ADALBERTO; et al. Increased glycosylated L-asparaginase production through selection of Pichia pastoris platform and oxygen-methanol control in fed-batches. Biochemical Engineering Journal, v. 173, SEP 2021. (17/20384-9, 18/15041-8, 17/25065-9, 13/08617-7, 19/02583-0, 19/02657-3)

COSTA-SILVA, T. A.; COSTA, I. M.; BIASOTO, H. P.; LIMA, G. M.; SILVA, C.; PESSOA, A.; MONTEIRO, G.. Critical overview of the main features and techniques used for the evaluation of the clinical applicability of L-asparaginase as a biopharmaceutical to treat blood cancer. BLOOD REVIEWS, v. 43, p. 17-pg., 2020-09-01. (18/15041-8, 13/08617-7, 16/25896-5, 15/07749-2)

LIMA, GUILHERME M.; ATRAZHEV, ALEXEY; SARKAR, SUSMITA; SOJITRA, MIRAT; REDDY, REVATHI; TORRES-OBREQUE, KARIN; RANGEL-YAGUI, CARLOTA DE OLIVEIRA; MACAULEY, MATTHEW S.; MONTEIRO, GISELE; DERDA, RATMIR. DNA-Encoded Multivalent Display of Chemically Modified Protein Tetramers on Phage: Synthesis and in Vivo Applications. ACS Chemical Biology, v. 17, n. 11, p. 12-pg., 2022-11-18. (19/09354-6, 16/22065-5, 18/15041-8, 13/08617-7, 18/15104-0)

Publicações acadêmicas

(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)

LIMA, Guilherme Meira. L-asparaginase de Erwinia chrysanthemi: expressão proteica livre de células e bioconjugação a bacteriófagos. 2020. Dissertação de Mestrado - Universidade de São Paulo (USP). Conjunto das Químicas (IQ e FCF) (CQ/DBDCQ) São Paulo.