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Construção de Plasmados otimizados CRISPR-Cas9 para a dissecção da via PI3K/Akt/FoxO pathway in Aedes Aegypti

Processo: 18/23231-1
Linha de fomento:Bolsas no Exterior - Estágio de Pesquisa - Iniciação Científica
Vigência (Início): 01 de fevereiro de 2019
Vigência (Término): 30 de abril de 2019
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Parasitologia - Entomologia e Malacologia de Parasitos e Vetores
Pesquisador responsável:Jayme Augusto de Souza-Neto
Beneficiário:Pedro Henrique de Andrade Affonso
Supervisor no Exterior: George Christophides
Instituição-sede: Instituto de Biotecnologia (IBTEC). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Botucatu. Botucatu , SP, Brasil
Local de pesquisa : Imperial College London, Inglaterra  
Vinculado à bolsa:18/14760-0 - O papel da via PI3K/Akt/FoxO na modulação da diversidade microbiana intestinal de Aedes aegypti, BP.IC
Assunto(s):Microbiota   Aedes aegypti   CRISPR-Cas9

Resumo

CRISPR-Cas9 é a ferramenta de edição de genomas mais precisa atualmente utilizada para o nocaute de genes específicos. Nosso colaborador e coordenador do VigLab, Imperial College London, Professor George Christophides, vem exercendo um papel de liderança no desenvolvimento de plasmídeos baseadas em CRISPR-Cas9. Estes plasmídeos promovem a expressão de Cas9 e sgRNAs e consequente levam ao nocaute de genes alvos de interesse. O Vigilab é atualmente financiado pela Fundação Bill e Melinda Gates para aplicar essa ferramenta no desenvolvimento de mosquitos transgênicos refratários ao Plasmodium, o parasita da malária. No presente projeto, utilizaremos a metodologia desenvolvida pelo Prof. Christophides para gerar plasmídeos otimizados para o nocaute importantes componentes da via PI3K/AKT/Foxo. Em nosso laboratório, identificamos esta via como um regulator chave da homeostasia intestinal. Esta via controla a expressão de genes relacionados a processos REDOX e antivirais, e modula a microbiota intestinal do vetor. O estudante também será treinado em importantes técnicas utilizadas pelo Vigilab para avaliar o envolvimento de bactérias no controle da homeostasia intestinal do mosquito. Nosso grupo já possui uma sólida parceria com o Prof. Christophides e este projeto será instrumental para aprimorar as técnicas atualmente utilizadas em Botucatu para o desenvolvimento de mosquitos mutantes por CRISPR-Cas9.

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