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Abordagem integrada na prospecção sustentável de produtos naturais marinhos: da diversidade a substâncias anticâncer

Processo: 18/25673-1
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Programa Capacitação - Treinamento Técnico
Vigência (Início): 01 de fevereiro de 2019
Vigência (Término): 31 de janeiro de 2020
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Morfologia - Citologia e Biologia Celular
Pesquisador responsável:Glaucia Maria Machado Santelli
Beneficiário:Lais Ichimura Fukase
Instituição-sede: Instituto de Ciências Biomédicas (ICB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
Vinculado ao auxílio:15/17177-6 - Abordagem integrada na prospecção sustentável de produtos naturais marinhos: da diversidade a substâncias anticâncer, AP.BTA.TEM
Assunto(s):Oncologia   Biologia celular   Bioprospecção   Produtos naturais   Anticarcinógenos   Cultura de células   Células tumorais cultivadas   Ciclo celular   Envelhecimento celular

Resumo

O presente trabalho tem por objetivo a identificação e caracterização da atividade antiproliferativa seletiva para células tumorais de compostos caracterizados no projeto temático. Para tal, serão desenvolvidas culturas 3D de células de câncer de mama e de pulmões humanos. A manutenção e a caracterização das culturas constituirão a principal atividade da bolsista, uma vez que estas são de grande importância para a definição da confiabilidade dos testes de avaliação da bioatividade das substancias. Os estudos sobre o mecanismo de ação consistirão em avaliar eventos da biologia celular que são afetados pelas substâncias selecionadas em etapas anteriores. Ensaios específicos serão realizados por citometria de fluxo, western blot e microscopia óptica, em tempo real e confocal de varredura a laser, para a identificação de elementos determinantes envolvidos com o mecanismo de ação dos compostos. Nestes experimentos a bolsista atuará em colaboração com os pos-graduandos envolvidos no projeto. A possível interferência das substâncias selecionadas sobre a progressão do ciclo celular será avaliada inicialmente por citometria de fluxo. Alterações fase específicas serão investigadas pela análise da expressão de marcadores de cada fase do ciclo celular. Dependendo do efeito, serão analisados marcadores das fases alteradas, que poderá envolver a expressão de proteínas ou seus mRNAs (G0/G1 ou G2/M) ou a incorporação de EdU ou BrdU (fase S). O destino das células tratadas será seguido por microscopia em tempo real, sendo avaliada tanto a indução de morte celular como de senescência. A morte celular por apoptose será avaliada morfologicamente, por citometria de fluxo com kits específicos e pela análise da fragmentação do DNA. A senescência celular será inicialmente avaliada pela detecção de beta- galatosidade, hidrolase que ocorre apenas nas células senescentes (kit Senescence beta-Galactosidase Staining).