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Validação de miRNAs identificados por microarray em amostras de câncer gástrico por qRT-PCR

Processo: 18/26796-0
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Programa Capacitação - Treinamento Técnico
Vigência (Início): 01 de fevereiro de 2019
Vigência (Término): 31 de março de 2019
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Genética - Genética Humana e Médica
Pesquisador responsável:Marilia de Arruda Cardoso Smith
Beneficiário:Camila Albuquerque Pinto
Instituição-sede: Escola Paulista de Medicina (EPM). Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus São Paulo. São Paulo , SP, Brasil
Vinculado ao auxílio:16/25562-0 - Abordagem molecular e funcional no câncer gástrico da população brasileira, AP.TEM
Assunto(s):Neoplasias gástricas   Análise de sequência com séries de oligonucleotídeos   MicroRNAs   Reação em cadeia da polimerase via transcriptase reversa quantitativa (qRT-PCR)

Resumo

O elevado índice de mortalidade do Câncer Gástrico (GC) é decorrente de sua detecção em fase avançada da doença, quando podem ser então, verificados sinais e sintomas da afecção. Não há assim, possibilidade de detecção precoce clinicamente neste tipo tumoral. A investigação de marcadores moleculares, que possam permitir a detecção precoce desta doença, assim, é promissora e pode levar à redução da mortalidade. Os micro RNAs (miRNAs) constituem uma classe de pequenas moléculas envolvidas no processo transcricional da regulação da expressão gênica; que, em geral, silenciam o gene alvo. Em Projeto Temático anterior "Aspectos genéticos e Epigenéticos na carcinogênese gástrica" (FAPESP Auxílio Temático 2009/07145-9) verificamos genes diferencialmente expressos, pela técnica de microarray de expressão, em duas linhagens de CG estabelecidas pelo nosso grupo, tratadas e não tratadas pelo agente desmetilante, 5-aza-2-deoxicitidina. Este procedimento evidenciou que a expressão dos miRNAs miR-21, miR-105-1, miR-519a2 estava regulada epigeneticamente, por meio da metilação do DNA e/ou da histona. A proposta atual visa validar estes miRNAs nos tumores, margem não neoplásica e em mucosas gástricas controles por meio da técnica de qRT-PCR. Além desta proposta, pretende-se iniciar a construção de uma biblioteca de cDNA para o sequenciamento de amostras de tecido gástrico, ampliando, potencialmente, o número de miRNAs envolvidos no desenvolvimento do CG.