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Holding time e tempo de equilíbrio: seus efeitos na criopreservação do espermatozoide suíno

Processo: 19/01124-1
Modalidade de apoio:Bolsas no Exterior - Estágio de Pesquisa - Mestrado
Vigência (Início): 18 de março de 2019
Vigência (Término): 17 de julho de 2019
Área do conhecimento:Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Reprodução Animal
Pesquisador responsável:André Furugen Cesar de Andrade
Beneficiário:Marina da Silva Passarelli Zanatta
Supervisor: Marc Yeste Oliveras
Instituição Sede: Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia (FMVZ). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
Local de pesquisa: Universitat de Girona, Espanha  
Vinculado à bolsa:17/10821-2 - Avaliação dos efeitos do tempo de equilíbrio nos protocolos de criopreservação de sêmen suíno: um estudo fisiológico e morfofuncional., BP.MS
Assunto(s):Criopreservação   Sêmen animal   Espermatozoides animal   Andrologia veterinária   Suínos
Palavra(s)-Chave do Pesquisador:Cachaço | Criopreservação | membranas | sêmen | tempo de equilibrio | Andrologia suína

Resumo

O uso de sêmen criopreservado na produção suína moderna representa apenas 1% de todas as inseminações artificiais realizadas em todo o mundo, portanto, sua aplicabilidade ainda é muito restrita, demandando mais estudos visando a melhoria dessa biotecnologia, o que levaria à sua plena implementação no nível comercial. Desta forma, várias técnicas vêm sendo desenvolvidas e aplicadas nas últimas décadas com o objetivo de melhorar a congelabilidade do sêmen, como a alteração dos protocolos de criopreservação, o uso de frações específicas do ejaculado, holding time e aplicação do tempo de equilíbrio. Assim, o objetivo do presente projeto é avaliar a aplicação do tempo de equilíbrio em protocolos de criopreservação de sêmen de suínos e aprofundar o entendimento desta ação em relação à fisiologia e morfofuncional dos espermatozoides suínos. Para este propósito, cinco cachaços de linhagem híbrida comercial serão usados. Vinte ejaculados serão coletados pela técnica de mão enluvada. Após a coleta, as amostras de sêmen serão analisadas quanto às características de motilidade pelo sistema de análise computadorizada do sêmen. As amostras de sêmen serão submetidas a um holding timede 24 horas. Após o mesmo, as amostras serão destinadas ao procedimento de criopreservação, permanecendo sob tempo de equilíbrio (5°C) por períodos de 0, 2 e 4 horas. Após a criopreservação, 4 palhetas serão descongeladas a 37°C por 30 segundos para análises de fisiologia espermática e morfofuncionalidade, como cinemática (CASA), determinação de radicais livres de cisteína na cabeça do espermatozoide, imunoprecipitação para HSP70 e avaliações de Western-blot. Para a análise estatística, será utilizado o software SAS (v. 9.3) e os dados serão analisados quanto à variância e normalidade dos resíduos. Os dados que não atenderem às premissas serão processados e submetidos ao PROC MIXED. As médias serão analisadas pelo teste de Tukey e o tempo ideal de equilíbrio será obtido por meio de uma equação de regressão polinomial. (AU)

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Publicações científicas
(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)
PASSARELLI, MARINA DA SILVA; PINOTI PAVANELI, ANA PAULA; RAVAGNANI, GISELE MOURO; MARTINS, MATHEUS PASINI; PEDROSA, ANA CAROLINA; MASSAMI KITAMURA MARTINS, SIMONE MARIA; DE ALCANTRA ROCHA, NATHALIA RAISSA; BITTAR RIGO, VICTOR HENRIQUE; YASUI, GEORGE; YESTE, MARC; et al. Effects of different equilibration times at 5 degrees C on boar sperm cryotolerance. Animal Reproduction Science, v. 219, . (16/24690-4, 19/01124-1, 17/10821-2)

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