Resumo
No carcinoma papilífero da tiroide (CPT), a mutação BRAF V600E é a alteração mais prevalente em adultos (40%). Por outro lado, no CPT pediátrico (d 18 anos), a mutação BRAF V600E é rara e as fusões envolvendo BRAF foram inicialmente identificadas em CPTs expostos à radiação. Ao contrário da mutação V600E, a fusão AGK-BRAF é raramente identificada em CPTs adultos. Nosso grupo mostrou, pela primeira vez, que a fusão AGK-BRAF é prevalente em casos pediátricos de CPT. Importante, a presença de alteração genética BRAF é específica para CPT e não foi identificada em lesões benignas ou outros subtipos de tumor da tiroide. Embora o BRAF V600E tenha sido associado a um pior prognóstico em adultos com CPT, pouco se sabe sobre o papel das alterações de BRAF em CPTs pediátricos. Este projeto visa aumentar nosso conhecimento sobre o papel da fusão AGK-BRAF, investigando os possíveis mecanismos associados à sua alta prevalência e pior prognóstico na população pediátrica. Para avaliar o potencial mecanismo associado à alta prevalência de AGK-BRAF, investigaremos a distância entre esses dois genes e como eles estão dispostos dentro do território cromossômico (TC) no núcleo normal do tecido tiroidiano, em populações pediátricas e adultas, utilizando o Técnica de DNA 3D-FISH. Além disso, a fim de compreender o papel da fusão AGK-BRAF na patogênese e no fenótipo celular do tumor da tiroide, uma linhagem celular tiroidiana normal será transfectada com plasmídeo contendo o rearranjo AGK-BRAF e, usando Microscopia de Iluminação Estruturada 3D (3D-SIM), compararemos com os efeitos do núcleo causados pelas alterações RET/PTC1, RET/PTC3, ETV6-NTRK3 e BRAF V600E, também identificadas em tumores pediátricos de tireoide, e tipo selvagem BRAF. Assim, os resultados deste projeto ajudarão a entender os mecanismos e as conseqüências do rearranjo AGK-BRAF.
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