Efeitos da nanocápsula de núcleo lipídico contendo Anexina A1 em modelo de Colite Ulcerativa induzida em camundongos

• Processo: 18/26383-7
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Vigência (Início): 01 de abril de 2019
• Situação: Interrompido
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Imunologia - Imunologia Celular
• Pesquisador responsável: Sandra Helena Poliselli Farsky
• Beneficiário: Milena Fronza Broering
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências Farmacêuticas (FCF). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Bolsa(s) vinculada(s): 22/05777-2 - Organoide intestinal como ferramenta de investigação da nanocápsula de núcleo lipídico multi parede funcionalizada com Anexna A1, BE.EP.DR
• Assunto(s): Farmacologia Nanocápsulas Anexina A1 Colite ulcerativa Modelos animais
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Caco-2 | camundongos C57BL | colite | Dss | Inflamação | 6 | Farmacologia

Resumo

A Anexina A1 (AnxA1) é um proteína de 37 KDa secretada por diversas células com papel modulador da resposta inflamatória. A AnxA1, importante proteína anti-inflamatória, modula a colite experimental e nosso grupo de pesquisa tem mostrado que a AnxA1 é mediador do tratamento da doença com infliximab. As nanocápsulas de núcleo lipídico (LNCs) carreiam moléculas de diferente natureza, entre as quais produtos biológicos, e tem habilidade de atravessar barreiras endógenas, demonstrando eficácia terapêutica após administração oral. Assim, o presente projeto tem por objetivo encapsular a AnxA1 em LNC (LNC-AnxA1) e testar sua eficácia em modelo in vivo de colite experimental induzida pelo DSS em camundongos C57Bl/6 pela administração oral, além de elucidar os efeitos da mesma em células Caco-2, uma linhagem de epitélio gastrointestinal. O encapsulamento da AnxA1 e sua caracterização físico-química serão realizados no laboratório de nanotecnologia da Universidade Federal do Rio Grande do Sul, seguindo o protocolo estabelecido pelas Professoras Silvia Guterres e Adriana Polhmann. A AnxA1 recombinante (rAnxA1) será cedida pelo Dr. Chris Reutlelinsgperger da Universidade de Maastrich, Holanda. A colite experimental será induzida pela administração oral de DSS 3% já estabelecido em nosso laboratório. O tratamento com LNC-AnxA1 será realizado a partir do 6° dia até o 10° dia após o início da indução da colite, por via oral, na concentração de 25 µg ao dia. No 11° dia, amostras do cólon e de sangue serão coletadas para caracterização histológica, de imuno-histoquímica, caracterização celular da lâmina própria por citometria de fluxo, vias de sinalização celular, leucograma e citocinas plasmáticas, além de cálculo do índice de atividade da doença. Serão realizados estudos in vitro com células Caco-2 estimuladas e observar a secreção de mediadores inflamatórios, como o TNF-± permeabilidade e integridade da barreira celular, além de alterações nas moléculas das junções intercelulares importantes para o desenvolvimento da doença. Em conjunto, os resultados obtidos poderão contribuir para a aplicação da rAnxA1 como uma ferramenta terapêutica para a colite, uma doença crônica que não possui tratamento efetivo que acomete cada vez mais pessoas mundialmente. (AU)

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

SCHARF, PABLO; BROERING, MILENA FRONZA; OLIVEIRA DA ROCHA, GUSTAVO HENRIQUE; FARSKY, SANDRA HELENA POLISELLI. Cellular and Molecular Mechanisms of Environmental Pollutants on Hematopoiesis. INTERNATIONAL JOURNAL OF MOLECULAR SCIENCES, v. 21, n. 19, OCT 2020. (17/05430-4, 19/19573-7, 18/26383-7, 14/07328-4)