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Desenvolvimento e validação de um ensaio combinado de LC-MS/MS para determinação de sirolimus, everolimus, tacrolimus e ciclosporina no sangue total

Processo: 19/03905-0
Linha de fomento:Bolsas no Exterior - Estágio de Pesquisa - Pós-Doutorado
Vigência (Início): 01 de julho de 2019
Vigência (Término): 31 de dezembro de 2019
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Farmacologia - Farmacologia Geral
Pesquisador responsável:Gilberto de Nucci
Beneficiário:Natalícia de Jesus Antunes
Supervisor no Exterior: Atholl Christopher Johnston
Instituição-sede: Faculdade de Ciências Médicas (FCM). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Campinas , SP, Brasil
Local de pesquisa : Queen Mary University of London, Inglaterra  
Vinculado à bolsa:16/22506-1 - Metabolismo do dapaconazol, BP.PD
Assunto(s):Imunossupressores   Cromatografia líquida acoplada à espectrometria de massas

Resumo

Na terapia com fármacos imunossupressores, o monitoramento terapêutico de fármacos é essencial para o sucesso do tratamento. Portanto, métodos analíticos com maior precisão, precisão, sensibilidade, seletividade e velocidade são mandatórios. Este projeto visa desenvolver um melhor protocolo de preparo de amostras para a quantificação simultânea de sirolimus, everolimus, tacrolimus e ciclosporina no sangue total por cromatografia líquida de ultra desempenho com espectrometria de massa em tandem (UHPLC-MS/MS). O preparo da amostra será realizado por precipitação de proteína com ZnSO4 e acetonitrila e extração líquido-líquido usando metanol. A separação dos fármacos será realizada com uma coluna Waters UPLC BEH C18 (50 mm × 2,1 mm) de 1,7 m mantida à 45 °C utilizando a fase móvel A, composta por de acetato de amônio 2 mM com 0,1% de ácido fórmico em água (v/v) e fase móvel B, consistindo de acetato de amônio 2 mM com 0,1% de ácido fórmico em metanol (v/v). O espectrômetro de massas operará em monitoramento de reação múltipla (MRM) em modo de ionização por eletronebulização operando no modo íon positivo. A validação do método será realizada de acordo com a diretriz de validação da da Agência Europeia de Medicamentos (EMA - European Medicines Agency). A comparação dos resultados obtidos com o método de LC-MS/MS de rotina anterior e o novo método LC-MS/MS mais rápido será realizada usando um conjunto de amostras de testes de proficiência e amostras reais de pacientes.

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