Melatonina e seus receptores MT1 e MT2: efeitos na apoptose, proliferação e potencial migratório de células de Carcinoma Ovariano (linhagem SKOV-3)

• Processo: 18/15797-5
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de junho de 2019
• Data de Término da vigência: 30 de abril de 2022
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Morfologia - Anatomia
• Pesquisador responsável: Luiz Gustavo de Almeida Chuffa
• Beneficiário: Maira Smaniotto Cucielo
• Instituição Sede: Instituto de Biociências (IBB). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Botucatu. Botucatu , SP, Brasil
• Assunto(s): Transformação celular neoplásica Melatonina Receptores de melatonina Apoptose Carcinoma Neoplasias ovarianas Mitocôndrias Inativação gênica
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Câncer de ovário | melatonina | mitocôndria | Receptores de Melatonina | Carcinogênese

Resumo

O Câncer de Ovário (CO) é a malignidade mais comum no sistema genital feminino e representa a quinta causa de morte por Câncer devido a sua progressão rápida e resistência aos tratamentos associado com baixo prognóstico. A melatonina (Mel), um neurohormônio secretado pela glândula pineal na fase de escuro, tem mostrado propriedades antitumorais em ensaios in vitro e in vivo. Evidências sugerem que a Mel, quando ligada aos seus receptores de membrana MT1 e MT2, possui um efeito oncostático em vários tipos de Cânceres, incluindo o CO. A Mel parece ter uma relação especial com a mitocôndria, organela responsável pela sua síntese, pelo metabolismo energético, morte e diferenciação celular, entre outros. Assim, o objetivo do presente estudo é avaliar a influência da terapia com melatonina sobre a via de sinalização endógena mitocondrial e a apoptose das células de Carcinoma Ovariano Humano (SKOV-3). E ainda, verificar se os efeitos biológicos resultantes da terapia são dependentes da ativação dos receptores MT1/2 através do silenciamento de RNAs (siRNAs). Para tanto, o trabalho será composto pelos grupos experimentais: grupo controle e grupo exposto a Mel (800, 1600 e 2400 ¼M); os grupos serão subdivididos quanto a presença dos receptores MT1/2 (grupos MT1/2+ tratados ou não com melatonina), ou ausência pelo silenciamento através do uso de siRNA (grupos MT1/2- tratados ou não com melatonina). Será realizado o teste de citotoxicidade celular através do ensaio de MTT, migração e invasão celular por insertos transwell, além do perfil geral de proteínas de adesão via ensaio multiplex. As análises do potencial de membrana mitocondrial, taxa de apoptose (AnexinaV) e ciclo celular serão realizadas por citometria de fluxo. Ainda será investigado a apoptose através da quantificação de proteínas Bcl-2, BAX, citocromo-C e caspase-3 ativa por western blotting. Em paralelo, serão mensurados os níveis de melatonina, lactato e glicose, e as mitocôndrias serão isoladas para análise da melatonina endógena e das enzimas envolvidas com a sua produção (AA-NAT e ASMT). Os achados no presente estudo poderão contribuir para a discussão atual sobre o papel da melatonina no metabolismo alterado das células neoplásicas do CO. (AU)

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

CHUFFA, L. G.; CUCIELO, M.; CARVALHO, R. F.; ROMAGNOLI, G. G.; KANENO, R.; SEIVA, F.. Melatonin reverses the Warburg-dependent effect in ovarian cancer cell by binding to the MT1 and MT2 receptors. Annals of Oncology, v. 31, p. 2-pg., 2020-09-01. (19/00906-6, 18/15797-5)

CUCIELO, MAIRA SMANIOTTO; CESARIO, ROBERTA CARVALHO; SILVEIRA, HENRIQUE SPAULONCI; GAIOTTE, LETICIA BARBOSA; ALCANTARA DOS SANTOS, SERGIO ALEXANDRE; DE CAMPOS ZUCCARI, DEBORA APARECIDA PIRES; FERREIRA SEIVA, FABIO RODRIGUES; REITER, RUSSEL J.; CHUFFA, LUIZ GUSTAVO DE ALMEIDA. Melatonin Reverses the Warburg-Type Metabolism and Reduces Mitochondrial Membrane Potential of Ovarian Cancer Cells Independent of MT1 Receptor Activation. Molecules, v. 27, n. 14, p. 15-pg., 2022-07-01. (19/00906-6, 18/15797-5)