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Estudo de adsorção e liberação de lisozima em filmes layer-by-layer por meio de sistema FRET

Processo: 19/06677-9
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
Vigência (Início): 01 de junho de 2019
Vigência (Término): 31 de maio de 2020
Área do conhecimento:Ciências Exatas e da Terra - Química - Química Orgânica
Pesquisador responsável:Luiz Henrique Catalani
Beneficiário:Raphael Colonese Vlasman
Instituição-sede: Instituto de Química (IQ). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
Vinculado ao auxílio:18/13492-2 - Arcabouços sintéticos e naturais aplicados à medicina regenerativa, AP.TEM

Resumo

Este projeto objetiva o estudo do processo de adsorção e dessorção da lisozima (LYS) em filmes multicamadas formados por automontagem Layer-by-layer (LbL) de heparina (HEP; monocamada negativa) e quitosana (CHI; monocamada positiva) sobre suporte de silício e suportes poliméricos de PLLA. O estudo será baseado na funcionalização dos componentes do sistema com sondas fluorescentes capazes de apresentar o efeito FRET (Fluorescence Ressonance Energy Transfer). Assim, a LYS será funcionalizada com isotiocianato de fluoresceína (LYSf), enquanto, a HEP será funcionalizada com cloreto de dansila (HEPd). Multicamadas LbL de HEP/HEPd e CHI serão montados nos suportes poliméricos e no suporte de silício e o mecanismo de adsorção das multicamadas será acompanhado em função da mudança de fluorescência. Em seguida, diferentes configurações das multicamadas contendo LYSf serão testadas para o estudo da migração da proteína entre os diferentes pares de camadas de polieletrólitos e da formação de complexos proteína-polieletrólito. Por último, será feito o estudo de liberação da LYSf variando a sua posição nas multicamadas (camadas iniciais, intermediárias e finais) e, assim, desenvolver um controle sobre a cinética de liberação. O objetivo principal é a verificação da formação de coacervados entre as proteínas e os polieletrólitos e como este evento pode influenciar no mecanismo de adsorção e dessorção das proteínas do sistema LbL.