Desenvolvimento de fase monolítica orgânica para determinação de peptídeos b-amilóide AB40 e AB42 em amostras de plasma de pacientes com a Doença de Alzheimer por UHPLC-MS/MS no modo column switching

• Processo: 19/04386-7
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de julho de 2019
• Data de Término da vigência: 30 de junho de 2023
• Área de conhecimento: Ciências Exatas e da Terra - Química - Química Analítica
• Pesquisador responsável: Maria Eugênia Queiroz Nassur
• Beneficiário: Caroline Fernandes Grecco
• Instituição Sede: Faculdade de Filosofia, Ciências e Letras de Ribeirão Preto (FFCLRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 17/02147-0 - Cromatografia líquida em uma gota e seu acoplamento com espectrometria de massas: estratégias instrumentais, desenvolvimento de materiais, automatização e aplicações analíticas, AP.TEM
• Assunto(s): Doença de Alzheimer Cromatografia Cromatografia líquida acoplada à espectrometria de massas Peptídeos beta-amiloides
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: B-amilóides | Column switching | Doença de Alzheimer | Fase monolítica orgânica | Lc-Ms | MS no modo Column Switching | Cromatografia

Resumo

A Doença de Alzheimer (DA) é uma demência neurodegenerativa progressiva que afeta cerca de 5% da população mundial com mais de 65 anos de idade, podendo manifestar-se também em indivíduos com menos de 40 anos (DA de acometimento precoce). A DA é caracterizada patologicamente pela presença de placas senis e de novelos neurofibrilares no cérebro. A formação das placas senis deve-se a acumulação extracelular dos peptídeos ²-amilóides, enquanto que os novelos neurofibrilares originam-se através do acumulo da proteína tau. A maioria dos fármacos desenvolvidos para o tratamento da DA procuram reduzir a produção, evitar a agregação e/ou promover a eliminação de peptídeos ²-amilóides. Considerando os impactos negativos que a DA causa na vida dos doentes, levando-os a perderem a autonomia nas atividades rotineiras e tornando-os dependente da ajuda de terceiros, torna-se fundamental a existência de um tratamento modificador da doença ou de caráter preventivo. Nesse sentido, os estudos têm sido direcionados para a determinação de peptídeos ²-amilóides como possíveis biomarcadores da doença de Alzheimer em fluidos biológicos. A cromatografia líquida acoplada à espectrometria de massas em tandem (LC-MS/MS) tem sido utilizada na determinação de compostos endógenos em fluidos biológicos. A etapa de preparo de amostras tem sido requerida no desenvolvimento de métodos LC-MS/MS, para eliminar os interferentes e pré-concentrar os analitos, quase sempre presentes em níveis de traços nas amostras biológicas. A LC-MS/MS no modo column switching permite a automação das análises através da hifenação da etapa de preparo de amostras biológicas (pré-concentração dos analitos e remoção de grande parte dos componentes interferentes) com o sistema cromatográfico. Os materiais biocompatíveis monolíticos orgânicos podem ser preparados por polimerização in situ, diretamente no interior do capilar de sílica fundida e apresentam algumas vantagens como alta estabilidade em ampla faixa de pH, fácil e rápida preparação, baixa pressão no sistema analítico e alta permeabilidade. Neste projeto, o método LC-MS/MS no modo column switching, será padronizado e validado para a determinação de peptídeos ²-amilóides A²40 e A²42 em amostras de plasma de pacientes com a doença de Alzheimer. Um monolito orgânico com grupos sulfônicos será sintetizado no interior de capilares de sílica fundida e utilizado na primeira dimensão (1D) do sistema column switching. O revestimento do material monolítico com materiais de acesso restrito (RAM) também será avaliado. Na segunda dimensão (2D) do sistema column switching serão avaliadas duas colunas analíticas, sendo uma em fase reversa (RP) e outra utilizando cromatografia líquida por interação hidrofílica (HILIC). (AU)

Publicações científicas

(6)

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

GRECCO, CAROLINE FERNANDES; TUMAS, VITOR; HALLAK, JAIME EDUARDO CECILIO; QUEIROZ, MARIA EUGENIA COSTA. In-tube solid-phase microextraction (sulfopropyl methacrylate-co-ethylene glycol dimethacrylate monolithic capillary) coupled to LC-MS/MS to determine beta amyloid peptides in Alzheimer's cerebrospinal fluid samples. SEPARATION SCIENCE PLUS, v. N/A, p. 12-pg., 2023-08-07. (17/02147-0, 20/00126-8, 19/04386-7)

GRECCO, CAROLINE FERNANDES; DE SOUZA, ISRAEL DONIZETI; OLIVEIRA, IGOR GUSTAVO CARVALHO; QUEIROZ, MARIA EUGENIA COSTA. In-Tube Solid-Phase Microextraction Directly Coupled to Mass Spectrometric Systems: A Review. SEPARATIONS, v. 9, n. 12, p. 19-pg., 2022-12-01. (17/02147-0, 19/19485-0, 20/00126-8, 20/06526-8, 19/04386-7)

CAROLINE F. GRECCO; EDUARDO JOSÉ CREVELIN; VITOR TUMAS; JAIME EDUARDO C. HALLAK; MARIA EUGÊNIA C. QUEIROZ. Disposable Pipette Extraction Followed by Direct MS/MS Analysis of Beta Amyloid Peptides (Aß38, Aß40, and Aβ42) in Cerebrospinal Fluid Samples. Journal of the Brazilian Chemical Society, v. 36, n. 1, 2024-06-17. (17/02147-0, 20/00126-8, 19/04386-7)

CRUZ, JONAS CARNEIRO; DE SOUZA, ISRAEL DONIZETI; GRECCO, CAROLINE FERNANDES; FIGUEIREDO, EDUARDO COSTA; QUEIROZ, MARIA EUGENIA COSTA. Recent advances in column switching high-performance liquid chromatography for bioanalysis. SUSTAINABLE CHEMISTRY AND PHARMACY, v. 21, JUN 2021. (19/19485-0, 19/04386-7, 20/00126-8, 17/02147-0)

COSTA QUEIROZ, MARIA EUGENIA; DE SOUZA, ISRAEL DONIZETI; DE OLIVEIRA, IGOR GUSTAVO; GRECCO, CAROLINE FERNANDES. In vivo solid phase microextraction for bioanalysis. TRAC-TRENDS IN ANALYTICAL CHEMISTRY, v. 153, p. 18-pg., 2022-05-04. (20/06526-8, 17/02147-0, 19/04386-7, 19/19485-0, 20/00126-8)

GRECCO, CAROLINE FERNANDES; DE SOUZA, ISRAEL DONIZETI; QUEIROZ, MARIA EUGENIA COSTA. Novel materials as capillary coatings for in-tube solid-phase microextraction for bioanalysis. JOURNAL OF SEPARATION SCIENCE, v. 44, n. 8, p. 1662-1693, APR 2021. (17/02147-0, 20/00126-8, 19/04386-7, 19/19485-0)

Publicações acadêmicas

(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)

GRECCO, Caroline Fernandes. Desenvolvimento de métodos espectrométricos (UHPLC-MS/MS e MS/MS) para a determinação de peptídeos β-amilóides em amostras de líquido cefalorraquidiano de pacientes com a doença de Alzheimer. 2023. Tese de Doutorado - Universidade de São Paulo (USP). Faculdade de Filosofia, Ciências e Letras de Ribeirão Preto (PCARP/BC) Ribeirão Preto.