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Avaliação do potencial diagnóstico de genes pertencentes a via MAP/KINASE em lesões de tireóide

Processo: 19/10211-5
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
Vigência (Início): 01 de agosto de 2019
Vigência (Término): 31 de julho de 2020
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Genética - Genética Humana e Médica
Pesquisador responsável:Renata de Azevedo Canevari
Beneficiário:João Paulo da Silva Queiroz
Instituição-sede: Instituto de Pesquisa e Desenvolvimento (IP&D). Universidade do Vale do Paraíba (UNIVAP). São José dos Campos , SP, Brasil
Assunto(s):Marcador molecular   Expressão gênica   Diagnóstico

Resumo

O câncer de tireoide é a patologia mais comum a acometer o sistema endócrino, e tem-se observado um aumento no número de casos diagnosticados nos últimos anos. A via de sinalização MAP/KINASE tem sido bem descrita como alvo de diagnóstico nas lesões que acometem a glândula, devido a alterações genéticas relacionadas ao desenvolvimento e progressão dos tumores. O diagnóstico é obtido pela associação de dois métodos: a ultrassonografia e a punção aspirativa por agulha fina. Entretanto, devido à baixa sensibilidade, ambos apresentam alta taxa de resultados inconclusivos, fazendo-se necessária uma busca assídua por métodos diagnósticos alternativos e com resultados mais precisos. A biologia molecular vem se destacando na busca de mutações genéticas e alterações de expressão gênica para possibilitar a identificação de potenciais marcadores diagnósticos nas diferentes lesões. Dessa forma, este estudo possui como objetivo analisar a expressão dos genes CDKN1C, CREB1, FOS, HSPA5, JUN, KSR1, MAP2K6, MAPK8IP2 e SFN, pertencentes a via MAP/KINASE como potenciais marcadores diagnósticos. Esses genes serão avaliados em 50 amostras de tecidos de tireoide, sendo: 10 amostras de CPT, 10 de CFT, 10 de bócio adenomatoso, 10 de tumores benignos (5 de adenoma folicular e 5 de hiperplasia folicular) e 10 de tecido não tumoral (nº 1.806.781/CEP/2016). Os protocolos RNeasy® Mini kit e SuperScript² IV First-Strand Synthesis System serão utilizados para a extração do RNA e síntese do cDNA, respectivamente. A análise de expressão gênica pela técnica de PCR quantitativa em tempo real (RT-qPCR) será realizada utilizando o RT² SYBR Green qPCR Master Mix no equipamento ABI Prism 7500 Sequence Detection Systems. Os dados obtidos serão traduzidos pelo software Sequence Detection System software 2.1. As análises estatísticas serão realizadas no software GraphPad Prism 5.00, incluindo o teste de Mann Whitney não paramétrico (p d 0,05). Como resultado, espera-se identificar potenciais marcadores moleculares da via MAP/KINASE com o intuito de auxiliar em um diagnóstico mais preciso destas lesões.