Engenharia de película adquirida para proteção contra cárie e erosão dentária: efeito da cistatina, estaterina e hemoglobina no perfil proteômico da película adquirida, no biofilme bacteriano e no esmalte dentário

• Processo: 19/08032-5
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de julho de 2019
• Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2023
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Odontologia - Odontologia Social e Preventiva
• Pesquisador responsável: Marília Afonso Rabelo Buzalaf
• Beneficiário: Tamara Teodoro Araujo
• Instituição Sede: Faculdade de Odontologia de Bauru (FOB). Universidade de São Paulo (USP). Bauru , SP, Brasil
• Bolsa(s) vinculada(s): 21/13657-4 - Design e caracterização de novas resinas funcionalizadas com conjugados de metacrilato-DNA hibridizados com peptídeo derivado da estaterina (StN15)-DNA, BE.EP.DR
• Assunto(s): Bioquímica Cárie dentária Erosão dentária Esmalte dentário Cistatinas Hemoglobinas Biofilmes
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Canecpi-5 | Estaterina | hemoglobina | Microbioma | película adquirida | Proteoma | Bioquímica

Resumo

A presença da Película Adquirida do Esmalte (PAE) é um dos fatores protetores contra a erosão e cárie dentária. Dentre as proteínas da película adquirida com potencial para se ligar ao esmalte e propriedades ácido-resistentes, foram identificadas recentemente pelo nosso grupo a cistatina, a hemoglobina (Hb) e a estaterina. A modificação do perfil proteico da película adquirida pela incorporação de algumas proteínas pode interferir na colonização bacteriana inicial do biofilme, alterando sua estrutura. Portanto esta modificação parece ser promissora não apenas para o controle da erosão, mas também para o controle da cárie dentária, o que tem sido pouco estudado. Assim, os objetivos desta pesquisa serão: 1) avaliar a alterações no perfil proteômico da película adquirida do esmalte após tratamento in vivo com CaneCPI-5, peptídeo derivado da estaterina (Stn15pSpS) e hemoglobina, isolados ou em combinação (subprojeto 1); 2) avaliar as alterações no perfil do biofilme de microcosmo de esmalte por meio da contagem de Unidades Formadoras de Colônias (UFC) após tratamento com diferentes concentrações de CaneCPI-5, peptídeo derivado da estaterina (Stn15pSpS) e hemoglobina, isolados e depois em combinação (subprojeto 2); 3) comparar a porcentagem de bactérias vivas e mortas presentes no biofilme formado mediante os tratamentos descritos acima, por fluorescência utilizando microscópio confocal (subprojeto 2); 4) comparar a desmineralização do esmalte provocada pelo biofilme microcosmo submetido aos tratamentos descritos acima, por microrradiografia transversal (subprojeto 2); 5) avaliar as alterações nas bactérias colonizadoras iniciais do biofilme de microcosmo após o tratamento do esmalte com CaneCPI-5, peptídeo derivado da estaterina (Stn15pSpS) e hemoglobina, isolados ou em combinação, por análise microbiômica (subprojeto 3). Para a primeira etapa, será conduzido um estudo cruzado e triplo cego, constituído por 5 fases paralelas no qual os voluntários farão o bochecho com uma solução contendo cada uma das proteínas/peptídeos ou a combinação. A película será coletada e preparada para a análise proteômica. Para a segunda etapa do estudo, serão confeccionados blocos de esmalte bovino (4x4 mm), que serão divididos em grupos de acordo com o tratamento (CaneCPI-5, Stn15pSpS, hemoglobina, clorexidina ou PBS). Os espécimes serão então incubados em pool de saliva humana e saliva artificial de McBain para formação do biofilme de microcosmos. Serão realizadas as análises de UFC, microscopia confocal e microradiografia transversal. Para a última etapa, o biofilme de microcosmos será cultivado com os tratamentos previamente estabelecidos e então será realizada a análise microbiômica. As proteínas avaliadas poderão, no futuro, ser incorporadas em produtos odontológicos, como dentifrícios, enxaguatórios ou géis, visando ao enriquecimento da PAE com as mesmas e, consequentemente, ao aumento da sua capacidade ácido-resistente. (AU)

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

BUZALAF, MARILIA AFONSO RABELO; ORTIZ, ADRIANA DE CASSIA; CARVALHO, THAMYRIS SOUZA; FIDELES, SIMONE ORTIZ MOURA; ARAUJO, TAMARA TEODORO; MORAES, SAMANTA MASCARENHAS; BUZALAF, NATHALIA RABELO; REIS, FERNANDA NAVAS. Saliva as a diagnostic tool for dental caries, periodontal disease and cancer: is there a need for more biomarkers?. EXPERT REVIEW OF MOLECULAR DIAGNOSTICS, v. 20, n. 5, MAR 2020. (18/18147-1, 19/08032-5, 18/18240-1)

ARAUJO, TAMARA TEODORO; CARVALHO, THAMYRIS SOUZA; DIONIZIO, ALINE; BOGAZ DEBORTOLLI, ANA LUIZA; OLIVEIRA VENTURA, TALITA MENDES; SOUZA, BEATRIZ MARTINES; VILAS BOAS FEITOSA, CHELSEA MARIA; PEREIRA BARBOSA, HELOISA APARECIDA; DA SILVA RIBEIRO, CAROLINE FERNANDA; MARTINI, TATIANA; et al. rotein-based engineering of the initial acquired enamel pellicle in vivo: Proteomic evaluatio. Journal of Dentistry, v. 116, JAN 2022. (19/19002-0, 18/12041-7, 19/08032-5, 19/26070-1)

ARAUJO, TAMARA TEODORO; CAMILOTI, GABRIEL DOMINGUES; VALLE, ALINE DIONIZIO; SILVA, NATARA DIAS GOMES; SOUZA, BEATRIZ MARTINES; CARVALHO, THAMYRIS DE SOUZA; CAMARA, JOAO VICTOR FRAZAO; SHIBAO, PRISCILA YUMI TANAKA; HENRIQUE-SILVA, FLAVIO; CRUVINEL, THIAGO; et al. A sugarcane cystatin (CaneCPI-5) alters microcosm biofilm formation and reduces dental caries. BIOFOULING, v. 37, n. 1, p. 109-116, JAN 28 2021. (19/26070-1, 19/08032-5)

Publicações acadêmicas

(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)

ARAUJO, Tamara Teodoro. Abrindo caminho para uso de proteínas ácido-resistentes no controle da cárie dentária por meio da engenharia de película adquirida e microbioma do biofilme dentário: estudos in vitro e in vivo de prova de conceito. 2024. Tese de Doutorado - Universidade de São Paulo (USP). Faculdade de Odontologia de Bauru (FOB/SDB) Bauru.