Identificação por meio de phage display com biblioteca sintética de cDNAs dos epítopos antigênicos de Schistosoma mansoni alvejados pela resposta imune de macacos Rhesus (Macaca mulatta) infectados pelo parasita e autocurados

• Processo: 19/09404-3
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado Direto
• Vigência (Início): 01 de agosto de 2019
• Vigência (Término): 30 de abril de 2023
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Sergio Verjovski Almeida
• Beneficiário: Daisy Woellner Santos
• Instituição Sede: Instituto de Química (IQ). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Parasitologia Macacos rhesus DNA complementar Schistosoma mansoni Phage display Resposta imune Técnicas de visualização da superfície celular Vacinas
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Autocura | Biblioteca sintética cDNA | macacos rhesus | phage display | Schistosoma mansoni | Vacina | Parasitologia

Resumo

A Esquistossomose, atualmente, é considerada a segunda principal Doença Tropical Negligenciada (DTN), estando presente em 78 países. Estima-se que no mundo cerca de 54 milhões de pessoas estejam infectadas pela espécie Schistosoma mansoni e 393 milhões vivendo em área de risco, sendo o praziquantel a única droga disponível para o tratamento dessa parasitose. O presente projeto de pesquisa busca identificar proteínas do parasita que sejam os alvos da resposta imune de macacos Rhesus infectados por S. mansoni, uma vez que nestes animais o curso da infecção inicia normalmente e, após um período de algumas semanas os macacos são capazes de autocurarem e desenvolverem uma forte resistência à um segundo desafio. Usaremos uma biblioteca sintética de oligos (cDNAs) que codificam todas as proteínas conhecidas do parasita. Para a biblioteca de oligos, fragmentos de todas as ORFs serão sintetizados pela técnica de releasable DNA microarray, totalizando aproximadamente 120.000 sequências que cobrem 13.000 genes codificadores de proteínas do parasita. Os fragmentos de proteínas codificados por estes oligos serão expressos como proteínas de fusão no capsídeo viral do bacteriófago PG8.2 pela técnica de phage display e o screening não-enviesado dos epítopos antigênicos será realizado pela exposição da biblioteca de fagos aos anticorpos presentes no plasma coletado ao longo da infecção e reinfecção (desafio) de cada um de 12 macacos rhesus infectados e autocurados. Os fagos ligados aos anticorpos do plasma serão imunoprecipitados e os seus insertos de cDNA serão sequenciados pela técnica de PhIP-Seq. Os resultados do sequenciamento serão analisados por ferramentas de bioinformática e correlacionados com o processo de autocura e resistência ao desafio, com a intenção de que sejam descobertos novos alvos candidatos vacinais para a Esquistossomose. (AU)

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

AMARAL, MURILO SENA; SANTOS, DAISY WOELLNER; PEREIRA, ADRIANA S. A.; TAHIRA, ANA CAROLINA; MALVEZZI, JOAO V. M.; MIYASATO, PATRICIA AOKI; FREITAS, RAFAELA DE PAULA; KALIL, JORGE; FAT, ELISA M. TJON KON; DE DOOD, CLAUDIA J.; et al. Rhesus macaques self-curing from a schistosome infection can display complete immunity to challenge. NATURE COMMUNICATIONS, v. 12, n. 1, OCT 26 2021. (16/10046-6, 15/06366-2, 19/09404-3, 18/15049-9, 18/18117-5, 18/23693-5)