Esteroidogênese na prole de ratos submetidos à restrição proteica materna: avaliação de microRNAs/mRNAs responsivos ao estrógeno e estudos funcionais na próstata

• Processo: 18/26120-6
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Vigência (Início): 01 de setembro de 2019
• Vigência (Término): 28 de fevereiro de 2021
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Morfologia - Histologia
• Pesquisador responsável: Luis Antonio Justulin Junior
• Beneficiário: Luiz Marcos Frediani Portela
• Instituição Sede: Instituto de Biociências (IBB). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Botucatu. Botucatu , SP, Brasil
• Assunto(s): Reprodução Desenvolvimento fetal Próstata Privação materna Dieta com restrição de proteínas MicroRNAs
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: desenvolvimento prostático | microRNA | Programação Fetal | próstata ventral | restrição proteica materna | Biologia da Reprodução

Resumo

A exposição a condições adversas em períodos críticos do desenvolvimento, como a gestação e lactação, podem acarretar alterações morfofuncionais irreversíveis no feto, sendo esse fenômeno conhecido como Programação Fetal (PF). Modelo extensamente utilizado em PF, a restrição proteica materna (RPM), é responsável por baixo peso ao nascimento e desenvolvimento de alterações sistêmicas na vida adulta. Trabalhos recentes do nosso grupo de pesquisa demonstraram que a RPM leva ao atraso no desenvolvimento da próstata em ratos jovens, ao aumento na razão estrógeno/andrógeno, e maior incidência de lesões prostáticas com o envelhecimento. Porém, os mecanismos moleculares que relacionados ao desequilíbrio hormonal e suas repercussões prostáticas ainda não foram esclarecidos. Dessa forma, os objetivos desse projeto serão: 1) avaliar o perfil da biossíntese dos hormônios esteroides (estrógeno e testosterona) na próstata e os tecidos com atividade esteroidogenica (testículo, fígado e cérebro), da prole de ratos submetidos a RPM, no dia pós natal 21 (DPN 21); 2) Associar estes dados à alteração de microRNAs/mRNAs responsivos ao estrógeno na próstata ventral (PV). Para isso, ratos Sprague Dawley nascidos de mães alimentadas com ração normal (17% de proteína, grupo CTR) ou com ração hipoproteica (6% de proteína, grupo RPGL) durante a gestação e lactação serão utilizados. Os animais serão eutanasiados no DPN21, e as PVs, testículo, fígado e cérebro serão coletados e armazenados em nitrogênio liquido. Serão avaliados a expressão gênica de enzimas da via esteroidogenica por RT-qPCR; os hormônios e metabólitos intermediários serão dosados no sangue por ELISA; análises imuno-histoquímicas na PV para os receptores androgênicos (AR) e estrogênicos (ER± e ER²). Os níveis de expressão do miR33-5p (previamente selecionado a partir de dados de sequenciamento) serão validados em amostras da PV de ratos. Este microRNA também será alvo de estudos funcionais a partir do tratamento de células prostáticas humanas normais da linhagem PNT-2 tratadas com estrógeno. Ensaios com moléculas inibidoras e miméticas do microRNA 33-5p também serão empregados. Neste caso, serão selecionados genes alvos deste microRNA para validação por RT-qPCR. Estes estudos irão auxiliar o entendimento dos mecanismos da ação estrogênica sobre a próstata de ratos submetidos a RPM. Este projeto se insere na linha de pesquisa vigente do responsável (FAPESP 2017/01063-7). (AU)

Publicações acadêmicas

(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)

PORTELA, Luiz Marcos Frediani. Esteroidogênese na prole de ratos submetidos à restrição proteica materna: avaliação e estudos funcionais de microRNAs/mRNAs responsivos à estrógeno na próstata. 2021. Dissertação de Mestrado - Universidade Estadual Paulista (Unesp). Instituto de Biociências. Botucatu Botucatu.