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Padronização da técnica RFLP para detecção da mutação DMRT3_chr23:g.22999655C>A em muares

Processo: 19/15076-9
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
Vigência (Início): 01 de setembro de 2019
Vigência (Término): 31 de agosto de 2020
Área do conhecimento:Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Clínica e Cirurgia Animal
Pesquisador responsável:José Paes de Oliveira Filho
Beneficiário:Amanda Manara Caceres
Instituição-sede: Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia (FMVZ). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Botucatu. Botucatu , SP, Brasil
Assunto(s):Genética animal   Polimorfismo de fragmento de restrição   Marcha (locomoção)   Genótipo   Mutação   Equídeos   Muares   Análise in silico   Técnicas de genotipagem

Resumo

Os equídeos possuem diversos tipos de andamentos, dentre eles estão as marchas batida e picada. O controle dos membros para a realização destes movimentos é coordenado principalmente pelo gene DMRT3. Estudos demonstram, nos equinos, forte relação entre a qualidade da marcha e a mutação DMRT3_chr23:g.22999655C>A, havendo associação do genótipo homozigoto afetado (AA) com a marcha picada (lateralizada). Uma vez que a marcha de muares também pode ser classificada como batida ou picada e consequentemente possa ser associada à mutação DMRT3_chr23:g.22999655C>A, este estudo tem como objetivo padronização da técnica RFLP (Restriction Fragment Length Polymorphism) para detecção da mutação DMRT3_chr23:g.22999655C>A em muares. Inicialmente será determinado in Silico a enzima de restrição que corte a referida mutação. Após o emprego da enzima, os genótipos obtidos serão submetidos ao sequenciamento de Sanger, para confirmação dos três diferentes genótipos, os quais serão utilizados como controles das reações de genotipagem por RFLP de 90 mulas com diferentes classificações de andamento. Esta padronização integra um recente auxílio FAPESP à pesquisa (em fase de contratação) outorgado para o responsável por este projeto de IC. Ao final deste projeto, espera-se que a aluna de IC dominem todas as técnicas de biomol empregadas no projeto e com os resultados da genotipagem verificar a relação do genótipo (CC, CA e AA) com o tipo da marcha.