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CRISPR/Cas9 em zebrafish (Danio rerio): padronização e otimização para identificar indivíduos mutados

Processo: 19/15594-0
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
Vigência (Início): 01 de setembro de 2019
Vigência (Término): 31 de agosto de 2020
Área do conhecimento:Ciências Agrárias - Recursos Pesqueiros e Engenharia de Pesca - Aquicultura
Pesquisador responsável:Rafael Henrique Nóbrega
Beneficiário:Jéssica Yumi Yamamoto Kita
Instituição-sede: Instituto de Biociências (IBB). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Botucatu. Botucatu , SP, Brasil
Assunto(s):Biotecnologia   Edição de RNA   Proteína 9 associada à CRISPR   Repetições palindrômicas curtas agrupadas e regularmente espaçadas   CRISPR-Cas9   Peixe-zebra   Danio rerio

Resumo

As técnicas de edição de genoma têm permitido expandir o conhecimento sobre os mecanismos de funcionamento dos sistemas biológicos, bem como avaliar a influência e função de diferentes genes no organismo. Com o surgimento do sistema de edição gênica CRISPR/Cas9, foi possível realizar mutações de forma mais precisas e eficientes, devido a simplicidade da técnica quanto a utilização de um RNA guia que auxiliará a endonuclease Cas9 a clivar a sequência alvo. No entanto, os estudos envolvendo essa técnica poderiam ser aprimorados para identificação dos indivíduos mutados. Além disso, um modelo vertebrado de pesquisa animal que tem ganhado muita atenção por sua similaridade genética com seres humanos é o zebrafish (Danio rerio). O zebrafish possui características interessantes quanto a estudos em laboratório por conta de seu tamanho, alta taxa de fecundação, fertilização, embriogênese ex vivo, transparência do corpo nos estágios iniciais de desenvolvimento, rápido desenvolvimento embriológico, baixo custo de manutenção e genoma conhecido. Dessa forma, torna-se essencial buscar aprimorar as técnicas de edição de genoma nesse animal, para que aumentando a taxa de eficiência de mutação, seja possível criar um método otimizado para identificação dos animais mutados, e que assim, seja possível ampliar e melhorar os futuros estudos quanto ao zebrafish na área da saúde e correlatas.