Papel da EPPIN (Epididymal Protease Inhibitor) sobre a maturação pós-testicular de espermatozóides de camundongos: consequências para a função espermática

• Processo: 19/13661-1
• Linha de fomento: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Vigência (Início): 01 de novembro de 2019
• Vigência (Término): 30 de abril de 2021
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Farmacologia - Farmacologia Bioquímica e Molecular
• Pesquisador responsável: Erick José Ramo da Silva
• Beneficiário: Alan Andrew dos Santos Silva
• Instituição-sede: Instituto de Biociências (IBB). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Botucatu. Botucatu , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 15/08227-0 - Estudo da EPPIN como macromolécula-alvo para contracepção masculina: desenvolvimento de modelo animal para avaliar a eficácia de fármacos contraceptivos masculinos, AP.JP
• Assunto(s): Fisiologia da reprodução Espermatozoides Dispositivos anticoncepcionais Inibidores de proteases Camundongos

Resumo

A EPPIN (Epididymal protease inhibitor) é um membro da superfamília de inibidores de protease, presente na superfície do espermatozoide, onde atua na regulação da motilidade espermática. Estudos demonstraram que anticorpos anti-EPPIN e moléculas de baixo peso molecular ligantes da EPPIN inibiram a motilidade progressiva de espermatozoides de primatas, demonstrando o potencial dessa proteína como alvo de fármacos contraceptivos masculinos. Pouco se sabe, entretanto, sobre o mecanismo de ação da EPPIN no controle da motilidade espermática, bem como seu papel em eventos pós-testiculares associados à competência fértil do espermatozoide que ocorrem durante seu trânsito pelo epidídimo e após a ejaculação, como maturação e capacitação espermática, respectivamente. Neste projeto, propomos investigar o impacto da maturação pós-testicular sobre a distribuição da EPPIN no espermatozoide de camundongos, bem como o seu papel em eventos associados à motilidade e capacitação. Para tal, avaliaremos a localização da EPPIN em espermatozoides nos diferentes estágios de maturação pós-testicular, incubados em condições que sustentam ou não a capacitação, por ensaios de imunofluorescência e de Western blot. Além disso, avaliaremos o impacto do bloqueio da EPPIN na superfície dos espermatozoides com dois anticorpos anti-EPPIN que reconhecem epítopos na região N- e C-terminal da EPPIN (Q20E e S21C, respectivamente) em eventos associados à motilidade e capacitação espermática: 1) motilidade ativada e hiperativada, por ensaios de CASA (Computer-assisted sperm analysis); 2) níveis intracelulares de AMPc, por ensaios de AlphaScreen; e 3) fosforilação da PKA (proteína quinase A), por ensaios de Western blot. Os resultados desse projeto fornecerão novas perspectivas sobre as funções da EPPIN no espermatozoide e para sua exploração como alvo farmacológico para contracepção masculina. (AU)

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

SILVA, ALAN A. S.; RAIMUNDO, TAMIRIS R. F.; MARIANI, NOEMIA A. P.; KUSHIMA, HELIO; AVELLAR, MARIA CHRISTINA W.; BUFFONE, MARIANO G.; PAULA-LOPES, FABIOLA F.; MOURA, MARCELO T.; SILVA, ERICK J. R.. issecting EPPIN protease inhibitor domains in sperm motility and fertilizing ability: repercussions for male contraceptive developmen. MOLECULAR HUMAN REPRODUCTION, v. 27, n. 12, DEC 2021. (19/13661-1, 15/08227-0, 17/11363-8)

Publicações acadêmicas

(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)

SILVA, Alan Andrew dos Santos. Papel da EPPIN (Epididymal protease inhibitor) sobre a maturação pós-testicular de espermatozoides de camundongos: consequências para a função espermática.. 2021. Dissertação de Mestrado - Universidade Estadual Paulista (UNESP). Instituto de Biociências. Botucatu Botucatu.