| Processo: | 19/18415-9 |
| Modalidade de apoio: | Bolsas no Brasil - Doutorado |
| Data de Início da vigência: | 01 de dezembro de 2019 |
| Data de Término da vigência: | 03 de julho de 2022 |
| Área de conhecimento: | Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Reprodução Animal |
| Pesquisador responsável: | Mateus José Sudano |
| Beneficiário: | Roniele Santana Valente |
| Instituição Sede: | Centro de Ciências Naturais e Humanas (CCNH). Universidade Federal do ABC (UFABC). Ministério da Educação (Brasil). Santo André , SP, Brasil |
| Bolsa(s) vinculada(s): | 22/00764-0 - A via de sinalização do NF-ºB é importante para o desenvolvimento e qualidade do embrião?, BE.EP.DR |
| Assunto(s): | Biotecnologia da reprodução Resposta inflamatória Criopreservação animal Bovinos NF-kappa B |
| Palavra(s)-Chave do Pesquisador: | competência embrionária | Criotolerancia | Embriões bovinos | fator nuclear kappa B | produção in vitro de embriões | Resposta inflamatória | Biotecnologia da Reprodução |
Resumo Um dos principais obstáculos para maior expansão da produção in vitro de embriões bovinos é a reduzida capacidade de sobrevivência dos embriões após serem submetidos à criopreservação. Quando expostas a situações de estresse, as células desenvolvem mecanismos de autodefesa que, em condições exacerbadas, podem levar à morte celular. O fator nuclear kappa B (NF-kB) é um fator de transcrição induzível conhecido por ser um regulador da resposta celular inflamatória e do desenvolvimento de mecanismos de defesa frente à uma ampla variedade de estímulos, controlando a expressão de inúmeros genes-alvo. No intuito de elucidar a participação do NF-kB nos mecanismos de sobrevivência embrionária, embriões bovinos serão produzidos in vitro com a suplementação isolada dos agentes moduladores da via NF-kB, indutor TNF (fator de necrose tumoral) e inibidor IL-13 (Interleucina 13) e com a associação de ambos (IL-13 + TNF) e posteriormente comparados a um grupo controle. Serão avaliadas as taxas de desenvolvimento embrionário, a abundância relativa de transcritos de genes inflamatórios e relacionado a estresse oxidativo. Blastocistos serão avaliados quando à viabilidade celular (Tunel) e expressão proteica de NF-Kb, IKB±, CASP3 e 8-OxoG através de imonofluorescência. O meio de cultivo será quantificado para presença de interleucinas inflamatórias. Em um segundo momento, as mesmas variáveis serão avaliadas em embriões tratados com IL-13 e controles submetidos a condições de estresse (frio e presença de H2O2) durante o cultivo. Por fim, será avaliada a criotolerância de embriões vitrificados e suplementados com IL-13 em duas diferentes situações: no meio de desenvolvimento embrionário e no meio de recultivo após aquecimento. Para análise estatística, modelos univariados de dados serão utilizados, assumindo o nível de significância de 5%. (AU) | |
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