Produção da citocina TGFb recombinante para análise do seu processamento proteolítico

• Processo: 19/24805-4
• Modalidade de apoio: Bolsas no Exterior - Estágio de Pesquisa - Iniciação Científica
• Vigência (Início): 01 de fevereiro de 2020
• Vigência (Término): 22 de março de 2020
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: André Zelanis Palitot Pereira
• Beneficiário: Uilla Barcick de Souza
• Supervisor: Nicholas J. Gay
• Instituição Sede: Instituto de Ciência e Tecnologia (ICT). Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus São José dos Campos. São José dos Campos , SP, Brasil
• Local de pesquisa: University of Cambridge, Inglaterra
• Vinculado à bolsa: 19/10817-0 - Avaliação do processamento proteolítico da citocina TGFB em secretomas de melanoma, BP.IC
• Assunto(s): Biomarcadores tumorais Progressão tumoral Melanoma Neoplasias Fator de crescimento transformador beta
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Biologia molecular | câncer | melanoma | Secretoma | TGFb | Produção de proteínas recombinantes

Resumo

A busca por biomarcadores de câncer consiste num dos campos em que se concentra uma grande quantidade de recursos humanos e, sobretudo, financeiros, tanto da iniciativa privada quanto da pesquisa pública em todo o mundo. As abordagens experimentais em proteômica voltadas para a prospecção de biomarcadores têm como objetivo encontrar proteínas específicas, padrões de expressão característicos ou ainda, marcadores de progressão tumoral. Num estudo recente acerca do processamento proteolítico no secretoma de um modelo pareado de melanoma murino, composto pelas linhagens Melan-a (melanócito normal) e Tm1 (o fenótipo tumoral correspondente) foi possível identificar, exclusivamente no fenótipo tumoral,eventos de processamento proteolítico em proteínas de importante papel no desenvolvimento tumoral. Dentre os sítios de clivagem observados, identificamos um peptídeo correspondente ao processamento da proteína precursora do TGFb3 em uma porção imediatamente anterior ao sítio de clivagem canônico para esta citocina. Do ponto de vista funcional, este achado sugere uma ativação não-canônica e autócrina de TGFb-3 por melanócitos transformados. Desta forma, este projeto tem como objetivo principal produzir acitocina TGFb de forma recombinante em células de rim derivadas de embrião humano (HEK293) com o intuito de se utilizar este produto para o entendimento do processamento proteolítico desta citocina num modelo celular de melanoma murino. (AU)