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Coexpressão neuronal de kisspeptina e de transportador vesicular de GABA e sua correlação com o ciclo estral

Processo: 19/24034-8
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
Vigência (Início): 01 de fevereiro de 2020
Vigência (Término): 30 de novembro de 2020
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Fisiologia
Pesquisador responsável:Renata Frazão
Beneficiário:Estela Guidini Ferrufino
Instituição-sede: Instituto de Ciências Biomédicas (ICB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
Assunto(s):Neurofisiologia   Hipotálamo   Reprodução   Retroalimentação   Ciclo estral animal   Kisspeptinas   GABA   Imuno-histoquímica

Resumo

A reprodução é um processo intrincado que envolve inúmeros hormônios e neuropeptídeos, além de ser modulada em suas diversas etapas pelo eixo hipotálamo-hipófise-gônadas. Esse eixo é controlado majoritariamente por neurônios secretores de hormônio liberador de gonadotrofina (GnRH), os quais são principalmente influenciados pela kisspeptina e pelo ácido gama-aminobutírico (GABA), secretados por neurônios do sistema nervoso central. Tal influência é conhecida, porém não se sabe com clareza como a relação entre esses dois elementos afeta o ciclo estral. Essa incógnita pode ser investigada através da análise de coexpressão do gene Kiss1 (expresso em neurônios produtores de kisspeptina) e do transportador vesicular de GABA (VGAT) em neurônios dos núcleos anteroventral periventricular e porção rostral do núcleo periventricular e arqueado (ARC). Para determinarmos o percentual de colocalização entre kisspeptinas e células VGAT positivas, camundongos fêmeas que expressam a enzima cre-recombinase sob o controle transcricional do VGAT e a proteína repórter fluorescente verde (GFP) induzida pela cre-recombinase serão avaliadas. Os animais terão ciclo estral acompanhado, sendo que após detecção da regularidade as fêmeas serão selecionadas para os experimentos em diferentes fases do ciclo estral: diestro, proestro e estro. Em seguida à perfusão transcardíaca nas fases específicas do ciclo, os encéfalos serão removidos, processados e submetidos ao procedimento de imuno-histoquímica. Levando em conta que as kisspeptinas são as principais moduladoras da atividade de neurônios GnRH e que os neurônios que expressam o gene Kiss1 no ARC são considerados responsáveis pela manutenção do mecanismo de retroalimentação negativa durante a maior parte do ciclo estral, verificar o percentual de coexpressão entre células kisspeptinas e GABAérgicas pode contribuir para o esclarecimento da possível modulação conjunta desses neurotransmissores na manutenção do ciclo estral.