Produção de concentrado de proteínas derivadas de células estromais multipotentes (MSC) para utilização clínica em medicina veterinária

• Processo: 20/00485-8
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Programa Capacitação - Treinamento Técnico
• Data de Início da vigência: 01 de abril de 2020
• Data de Término da vigência: 31 de julho de 2021
• Área de conhecimento: Ciências Agrárias - Medicina Veterinária
• Pesquisador responsável: Marina Landim e Alvarenga
• Beneficiário: Driéle Bretones dos Santos
• CNAE: Atividades veterinárias
• Vinculado ao auxílio: 18/08295-3 - Produção de concentrado de proteínas derivadas de células estromais multipotentes (MSC) para aplicação clínica em medicina veterinária, AP.PIPE
• Assunto(s): Células-tronco Terapia baseada em transplante de células e tecidos Proteômica
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Células-tronco | Medicina Veterinária | meio condicionado | proteômica | Terapia celular

Resumo

As células estromais multipotentes (MSCs) são células que apresentam a capacidade de auto renovação e diferenciação in vitro em células de várias linhagens, tornando-as atrativas para a medicina regenerativa, engenharia de tecidos e terapia celular. Um dos principais mecanismos pelo qual as CTMs atuam na regeneração tecidual está relacionado à sua atividade parácrina, através da liberação de diversas citocinas, substâncias antioxidantes e fatores tróficos e de crescimento, criando um microambiente favorável com capacidade de modular respostas imunes e inflamatórias. Nesse sentido, a avaliação do conteúdo proteico do secretoma do meio condicionado por essas células busca entender suas propriedades e possíveis aplicações na medicina regenerativa. Diversos estudos têm demonstrado a eficácia da utilização do secretoma produzido por CTMs para o tratamento de lesões renais, ósseas, neurológicas, dermatológicas, hepáticas, pulmonares e do sistema imunológico. Apesar das inúmeras vantagens apontadas com o uso do secretoma das MSCs, sua produção ainda é limitada pelo tipo de cultivo celular utilizado nos dias de hoje. Nos cultivos tradicionais a expansão celular ocorre de forma estática em garrafas, sem agitação levando a falta de acompanhamento e controle das condições ambientais, limitando a produtividade. Assim, alternativas para expansão celular em larga escala passaram a ganhar espaço, dentre elas o uso de biorreatores. No entanto, a produção em larga escala em biorreatores e a composição do secretoma nestas condições de cultivo ainda não são conhecidos impedindo sua ampla utilização na terapia regenerativa. Portanto, o objetivo deste projeto é produzir e analisar o secretoma de MSCs caninas obtidas de tecido adiposo cultivadas em garrafas e em biorreatores tipo frasco Spinner, com o objetivo de criar um produto a ser utilizado em protocolos terapêuticos para o tratamento de doenças caninas degenerativas. Para tanto serão realizados 4 experimentos que visam: 1) definir o melhor sistema para produção de MC para o uso futuro em medicina regenerativa (cultivo estático ou biorreatores modelo spinner); 2) estudar a estabilidade do meio condicionado por MSCs líquido ou liofilizado mantido sob diferentes condições de armazenagem; 3) avaliar quantitativa e qualitativamente o secretoma das MSC produzidas no experimento 1 e 4) realizar um teste de segurança terapêutica do MC para tratamento de sequela de cinomose em cães.