Geração de células-tronco de pluripotência induzida (iPSCs) a partir de células adultas de veado-mateiro-pequeno (Mazama bororo)

• Processo: 20/08562-1
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de dezembro de 2020
• Data de Término da vigência: 31 de março de 2022
• Área de conhecimento: Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Reprodução Animal
• Pesquisador responsável: Fabiana Fernandes Bressan
• Beneficiário: Luana Scarpelini Rosa
• Instituição Sede: Faculdade de Zootecnia e Engenharia de Alimentos (FZEA). Universidade de São Paulo (USP). Pirassununga , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 15/26818-5 - Investigação de mecanismos celulares e moleculares da aquisição da toti- e pluripotência induzida in vitro - modelo translacional, AP.JP
• Assunto(s): Conservação genética Biotecnologia da reprodução Células-tronco pluripotentes induzidas Fibroblastos Mazama bororo
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Células de pluripotência induzida | Cervídeos | fibroblastos adultos | Gfp+ | Reprodução Animal | veado-mateiro- pequeno | Conservação de Animais Silvestres

Resumo

O Brasil possui uma das biodiversidades mais ricas do mundo, porém ela se encontraem constante ameaça devido a ações antropológicas que impactam diretamente o meioambiente. Atualmente, 1.173 espécies brasileiras de animais são consideradas ameaçadas,dentre elas, o veado-mateiro-pequeno (Mazama bororo), animal endêmico à Mata Atlântica,que possui uma das menores distribuições geográficas dentre toda a família de cervídeos e éconsiderado vulnerável tanto pela IUCN como pelo Ministério do Meio Ambiente. Diversasinstituições, assim como políticas públicas, têm buscado medidas de conservação para ajudara preservar as espécies em risco de extinção. Nesse contexto, as biotecnologias reprodutivassurgem como importante recurso para a conservação da genética dos animais. Nesse estudo,buscamos a produção e caracterização de células-tronco de pluripotência induzida (iPSC) apartir de fibroblastos adultos de Mazama bororo, ainda inédita na espécie. Para tal,fibroblastos já previamente coletados e armazenados serão cultivados e transduzidos comvetores lentivirais policistrônicos que expressam OCT4, SOX2, KLF4 e c-MYC humanos oumurinos (hOSKM ou mOSKM). É esperada a geração de iPSCs e caracterização quanto àdetecção da fosfatase alcalina, imunocitoquímica para proteínas de pluripotência OCT4,SOX2 e NANOG, formação de corpos embrióides e diferenciação in vitro, seguido de análiseda expressão de genes relacionados à pluripotência e ensaio de teratoma. A geração de célulasiPS a partir de células somáticas é bastante promissora na medicina humana e veterinária,sendo que possibilidades para o seu uso envolvem desde estudos de doenças e terapiasregenerativas a contribuições para a correção de infertilidades, incluindo a geração degametas e embriões in vitro, a partir de bancos de células e material genético previamentearmazenados. Até o presente momento não há o conhecimento de geração de células iPSCprovenientes da família de cervídeos na literatura. A obtenção de iPSC proposta pelo estudoserá uma grande contribuição para as biotecnologias reprodutivas utilizadas na conservaçãotanto da espécie em si, como para outros animais da família cervidae.