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Caracterização do interactoma celular das proteínas E, M e N do novo Coronavírus de 2019 (SARS-CoV-2)

Processo: 20/09310-6
Modalidade de apoio:Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
Vigência (Início): 01 de setembro de 2020
Vigência (Término): 31 de agosto de 2022
Área do conhecimento:Ciências da Saúde - Nutrição - Bioquímica da Nutrição
Pesquisador responsável:Fernando Moreira Simabuco
Beneficiário:Érika Pereira Zambalde
Instituição Sede: Faculdade de Ciências Aplicadas (FCA). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Limeira , SP, Brasil
Vinculado ao auxílio:20/05346-6 - Estudos de interação entre proteínas celulares e proteínas virais do novo coronavírus de 2019 (SARS-CoV-2), AP.R
Assunto(s):Biologia molecular   Interactoma   Nucleocapsídeo   Proteínas da matriz viral   Replicação viral   Betacoronavirus   SARS-CoV-2   COVID-19   Imunoprecipitação   Espectrometria de massas   Humanos
Palavra(s)-Chave do Pesquisador:Covid19 | interactoma | nucleocapsídeo | proteômica | SARS-CoV-2 | vias de sinalização | Biologia molecular

Resumo

O SARS-CoV-2 causa a COVID19, caracterizada por febre, tosse, fadiga e quadros graves de pneumonia, tendo atingido até o momento mais de 10 milhões de pessoas no mundo. Três das proteínas estruturais do vírus, as proteínas E, M e N, são responsáveis pela montagem da partícula viral, entre outros processos. A proteína N tem alta afinidade pelo RNA viral, formando o nucleocapsídeo viral. Já as proteínas de membrana E e M são responsáveis pela morfologia do virion e por interações tanto com a proteína S, que reconhece o receptor celular, quanto com o nucleocapsídeo viral. O processo de replicação dos Coronavírus é altamente regulado, envolvendo diferentes atuações das proteínas não estruturais e estruturais do vírus. Entretanto, pouco se sabe sobre quais são as proteínas celulares que participam da montagem das partículas virais dos coronavírus. Este projeto tem por objetivo identificar o interactoma das proteínas E, M e N do SARS-CoV-2 em células humanas, entendendo suas interações moleculares com proteínas celulares e as vias celulares de que esse vírus se beneficia para completar seu ciclo de replicação. Para tanto, faremos a optimização dos genes que codificam E, M e N para expressão em células humanas, seguida de imunoprecipitação e caracterização por espectrometria de massas de proteínas celulares interagentes. Após validadas, tais interações serão desafiadas com intervenções farmacológicas in vitro, com o intuito de verificar seu potencial de bloquear ou interferir na replicação viral. Esses compostos serão finalmente testados em modelo in vitro de cultura de células humanas infectadas com o SARS-CoV-2, analisando-se carga viral, efeito citopático e alterações moleculares nas células. O presente projeto de pesquisa pretende, portanto, contribuir para um melhor entendimento dos mecanismos moleculares e celulares associados com a replicação do SARS-CoV-2 em células humanas e para a racionalização de potenciais futuras terapias contra o COVID-19. (AU)

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Publicações científicas
(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)
MANCINI, MARIANA C. S.; MORELLI, ANA P.; SEVERINO, MATHEUS B.; PAVAN, ISADORA C. B.; ZAMBALDE, ERIKA P.; GOIS, MARIANA M.; DA SILVA, LUIZ G. S.; QUINTERO-RUIZ, NATHALIA; ROMEIRO, CAIO F.; DOS SANTOS JR, DANIEL F. G.; et al. Knockout of NRF2 triggers prostate cancer cells death through ROS modulation and sensitizes to cisplatin. Journal of Cellular Biochemistry, v. 123, n. 12, p. 14-pg., . (20/09310-6, 20/09133-7, 16/06457-0, 20/13660-2, 20/09527-5, 15/00311-1, 20/08684-0, 18/14818-9, 19/00607-9, 19/25582-9, 19/25731-4)

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