Produção de enzimas essenciais na aplicação das técnicas de RT-qPCR e RT-LAMP

• Processo: 20/12041-7
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Programa Capacitação - Treinamento Técnico
• Data de Início da vigência: 01 de novembro de 2020
• Data de Término da vigência: 28 de fevereiro de 2022
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Enzimologia
• Pesquisador responsável: Naiara Utimura Torres
• Beneficiário: Melissa Cristina do Espirito Santo
• CNAE: Fabricação de produtos químicos não especificados anteriormente
• Vinculado ao auxílio: 20/04954-2 - Desenvolvimento de kits para detecção de COVID-19 pelo método de RT-PCR multiplex em tempo real e colorimétrico por RT-LAMP, AP.PIPE
• Assunto(s): Reação em cadeia da polimerase via transcriptase reversa quantitativa (qRT-PCR) COVID-19 Técnica de amplificação isotérmica mediada por loop com transcriptase reversa (RT-LAMP) Diagnóstico Técnicas e procedimentos diagnósticos Kit de reagentes para diagnóstico
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Bst DNA polimerase | Covid-19 | GoldTaq DNA polimerase | Inibidor de RNase | Rt-Lamp | RT-qPCR | Produção heteróloga de proteínas

Resumo

A COVID-19 (do inglês, Coronavirus Disease 2019) é uma doença decretada como pandêmica desde janeiro de 2020. A partir dessa data, diversos governos têm incentivado o diagnóstico da COVID-19 com kits baseados na análise de ácidos nucleicos virais, como técnicas de RT-qPCR e RT-LAMP. No Brasil, a produção de tais kits têm sido realizada por poucas empresas e instituições que, apesar do enorme esforço, não são capazes de suprir a demanda nacional e dependem de reagentes importados (como Taq DNA polimerase Hot Start, Bst DNA polimerase e Inibidor de RNase). Uma vez que os países fornecedores de tais reagentes também estão afetados pela COVID-19, o mundo tem sofrido de uma grande escassez desses insumos. A Cellco Biotec do Brasil LTDA produz nacionalmente as enzimas aqui citadas e está desenvolvendo kits de detecção da COVID-19. Para a fabricação dos mesmos, serão necessárias grandes produções heterólogas de Taq DNA polimerase Hot Start, Bst DNA polimerase e Inibidor de RNase, além de suas purificações por cromatografias líquidas e testes de atividade enzimática. Dessa forma, esse projeto visa o auxílio técnico nas etapas de produção e validação dessas enzimas, bem como o envasamento dos kits de detecção da COVID-19, contribuindo, assim, para o desenvolvimento e disponibilidade dos kits de diagnóstico da COVID-19 tão escassos e essenciais nos dias atuais.