Estabelecimento de um modelo tridimensional para determinação da eficácia e segurança farmacológica de derivados de nitrofuranos e indólicos e avaliação da infecção de Histoplasma capsulatum

• Processo: 20/15586-4
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado Direto
• Data de Início da vigência: 01 de abril de 2021
• Data de Término da vigência: 30 de novembro de 2022
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Farmácia
• Pesquisador responsável: Ana Marisa Fusco Almeida
• Beneficiário: Carolina Orlando Vaso
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências Farmacêuticas (FCFAR). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Araraquara. Araraquara , SP, Brasil
• Assunto(s): Micologia Histoplasma Farmacologia Nitrofuranos Toxicidade Modelagem tridimensional Modelos animais
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Histoplasma capsulatum | mecanismo de ação | Modelo tridimensional | Nitrofuranos e indólicos | Segurança farmacológica | Micologia

Resumo

Histoplasma capsulatum é um fungo causador da Histoplasmose, uma Micose sistêmica e endêmica mundialmente. No Brasil, essa Micose afeta principalmente a região sudeste, causando graves problemas na saúde pública. Existe um número restrito de fármacos antifúngicos para o tratamento das Micoses em geral e, particularmente da Histoplasmose, que apresentam efeitos adversos significativos como toxicidade renal e hepática. Este fator, somado aos crescentes relatos de resistência antifúngica e à formação de biofilmes por esses fungos, faz com que seja emergente o desenvolvimento de novos antifúngicos mais eficazes tanto contra as células planctônicas quanto para os biofilmes e que tenham toxicidade reduzida. Sendo assim, este trabalho tem o objetivo de verificar a atividade anti-Histoplasma de derivados nitrofuranos e indólicos, bem como averiguar o(s) seu(s) possível(is) mecanismo(s) de ação. Além disso, pretende-se estabelecer um modelo tridimensional formado por células pulmonares para o estudo da interação H. capsulatum-hospedeiro aplicando metodologias moleculares e para avaliar a toxicidade dos compostos. Serão utilizadas duas cepas de H. capsulatum, EH-315 e a ATCC 26032 (G217-B). Os compostos derivados de nitrofuranos e indólicos foram elaborados e produzidos pelo grupo de pesquisa do Prof. Dr. Luigi Scipione da Universidade de Roma, na Itália. Os testes de sensibilidade serão conduzidos de acordo com o documento M27-A3, proposto pelo Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI, 2008), com pequenas modificações. Será realizada a Concentração Fungicida Mínima (CFM). Os compostos mais potentes serão submetidos ao teste de citotoxicidade em culturas tridimensionais e monocamada das linhagens A549 e MRC-5. Os compostos que obtiverem os melhores índices de seletividade, serão avaliados quanto à capacidade de inibir as células planctônicas na concentração de biofilme, biofilme inicial e biofilme maduro. Para isto, será quantificada as atividades metabólicas dos biofilmes (planctônica concentração de biofilme, iniciais e maduros) pelo método de redução do sal tetrazólico XTT e obtidas imagens de Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV), para verificarmos possíveis danos. Para determinar os mecanismos de ação serão realizadas: a quantificação do ergosterol da membrana, avalição do mecanismo de morte celular pelo ensaio de iodeto de propídio (PI) e Anexina (FITC), dosagem das espécies reativas de oxigênio (ROS), danos de parede e membrana celular por MEV, microscopia confocal e microscopia de transmissão. Além disto, a toxicidade será verificada em larvas de Caenorhabditis elegans, a teratogenicidade em embriões de Zebrafish e a mutagenicidade pelo teste de micronúcleo. (AU)

Publicações científicas

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(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

VASO, CAROLINA ORLANDO; BILA, NIURA MADALENA; PANDOLFI, FABIANA; DE VITA, DANIELA; BORTOLAMI, MARTINA; CARVALHO BONATTI, JEAN LUCAS; DE MORAES SILVA, ROSANGELA APARECIDA; CARVALHO GONCALVES, LARISSA NAIARA; TUDINO, VALERIA; COSTI, ROBERTA; et al. Evaluation of the Anti-Histoplasma capsulatum Activity of Indole and Nitrofuran Derivatives and Their Pharmacological Safety in Three-Dimensional Cell Cultures. PHARMACEUTICS, v. 14, n. 5, p. 23-pg., 2022-05-01. (20/15586-4, 19/22188-8, 18/02785-9, 17/18388-6, 16/11836-0)

BILA, NIURA MADALENA; COSTA-ORLANDI, CAROLINE BARCELOS; VASO, CAROLINA ORLANDO; BONATTI, JEAN LUCAS CARVALHO; DE ASSIS, LETICIA RIBEIRO; REGASINI, LUIS OCTAVIO; FONTANA, CARLA RAQUEL; FUSCO-ALMEIDA, ANA MARISA; MENDES-GIANNINI, MARIA JOSE SOARES. 2-Hydroxychalcone as a Potent Compound and Photosensitizer Against Dermatophyte Biofilms. FRONTIERS IN CELLULAR AND INFECTION MICROBIOLOGY, v. 11, MAY 13 2021. (18/02785-9, 19/22188-8, 20/15586-4, 17/18388-6)

COSTA-ORLANDI, CAROLINE B.; BILA, NIURA M.; BONATTI, JEAN LUCAS C.; VASO, CAROLINA O.; SANTOS, MARIANA B.; POLAQUINI, CARLOS R.; BIASIOLI, MARIANA M. SANTONI M.; HERCULANO, RONDINELLI D.; REGASINI, LUIS O.; FUSCO-ALMEIDA, ANA MARISA; et al. Membranolytic Activity Profile of Nonyl 3,4-Dihydroxybenzoate: A New Anti-Biofilm Compound for the Treatment of Dermatophytosis. PHARMACEUTICS, v. 15, n. 5, p. 19-pg., 2023-05-04. (17/18388-6, 19/22188-8, 18/02785-9, 20/15586-4)

VASO, CAROLINA ORLANDO; PANDOLFI, FABIANA; BILA, NIURA MADALENA; DE VITA, DANIELA; BORTOLAMI, MARTINA; SOARES MENDES-GIANNINI, MARIA JOSE; TUDINO, VALERIA; COSTI, ROBERTA; COSTA-ORLANDI, CAROLINE BARCELOS; FUSCO-ALMEIDA, ANA MARISA; et al. Synthesis and Evaluation of the Antifungal and Toxicological Activity of Nitrofuran Derivatives. PHARMACEUTICS, v. 14, n. 3, p. 19-pg., 2022-03-01. (20/15586-4, 16/11836-0, 19/22188-8, 17/18388-6)

FUSCO-ALMEIDA, ANA MARISA; SILVA, SAMANTA DE MATOS; DOS SANTOS, KELVIN SOUSA; GUALQUE, MARCOS WILLIAM DE LIMA; VASO, CAROLINA ORLANDO; CARVALHO, ANGELICA ROMAO; MEDINA-ALARCON, KAILA PETROLINA; PIRES, ANA CAROLINA MOREIRA DA SILVA; BELIZARIO, JENYFFIE ARAUJO; DE SOUZA FERNANDES, LIGIA; et al. Alternative Non-Mammalian Animal and Cellular Methods for the Study of Host-Fungal Interactions. JOURNAL OF FUNGI, v. 9, n. 9, p. 29-pg., 2023-09-01. (20/15586-4, 21/14839-9, 21/03805-6, 19/23622-3)

Publicações acadêmicas

(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)

VASO, Carolina Orlando. Estabelecimento de um modelo tridimensional para determinação da eficácia e segurança farmacológica de derivados de nitrofuranos e indólicos e avaliação da infecção de Histoplasma capsulatum. 2022. Tese de Doutorado - Universidade Estadual Paulista (Unesp). Faculdade de Ciências Farmacêuticas. Araraquara Araraquara.