Avaliação do efeito pró-osteo/odontogênico da cistatina recombinante de cana-de-açúcar, CaneCPI-5, em células pulpares humanas

• Processo: 20/09576-6
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de junho de 2021
• Data de Término da vigência: 30 de abril de 2022
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Odontologia - Endodontia
• Pesquisador responsável: Gisele Faria
• Beneficiário: Ana Flávia Balestrero Cassiano
• Instituição Sede: Faculdade de Odontologia (FOAr). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Araraquara. Araraquara , SP, Brasil
• Assunto(s): Catepsinas Cistatinas Fitocistatinas Polpa dentária
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Células da polpa dental | cistatinas | Diferenciação osteo | fitocistatinas | odontogênica | Reparação pulpar

Resumo

As catepsinas (um grupo de cisteíno proteases) apresentam importante papel em alguns processos patológicos. Sabe-se que um aumento da atividade das mesmas está relacionado ao desenvolvimento de doenças como a osteoporose e a periodontite apical (lesão periapical), por estimularem o processo de reabsorção óssea, através da degradação proteolítica de componentes da matriz. Portanto sua inibição poderia ser alvo terapêutico para o controle dessas doenças. As cistatinas são inibidores naturais e reversíveis de cisteíno proteases. As fitocistatinas são cistatinas de plantas e algumas delas já foram produzidas de forma recombinante, como a CaneCPI-5 (derivada da cana-de-açúcar), a qual será foco deste estudo por ter apresentado potencial pró-osteogênico observado em estudo preliminar do nosso grupo de pesquisa. O objetivo deste estudo será avaliar a citocompatibilidade e o efeito da CaneCPI-5 sobre a proliferação, migração, diferenciação osteogênica e odontogênica, e capacidade de estimular mineralização de células da polpa dental humana (hDPCs). As hDPCs expostas à CaneCPI- 5 e não expostas (controle) serão avaliadas quanto à viabilidade por meio dos ensaios de metiltiazol tetrazólico (MTT) e vermelho neutro, proliferação pelo ensaio de incorporação de bromodeoxiuridina (BrdU), migração por ensaio de transwell, expressão gênica de marcadores relacionados a diferenciação osteogênica e odontogênica por meio de reação da polimerase em cadeia em tempo real quantitavo (qRT-PCR), produção de proteínas por Western Blotting, atividade da fosfatase alcalina pelo cálculo da liberação timolftaleína e a detecção de precipitados inorgânicos pela coloração de vermelho de alizarina. Se o efeito pró-osteogênico e/ou odontogênico da CaneCPI-5 nas hDPCs for confirmado, iremos projetar ensaios para avaliar o efeito da CaneCPI-5, em contato com a dentina, sobre as hDPCs. Caso os resultados sejam promissores, a CaneCPI-5 poderá se constituir em uma molécula com potencial para ser utilizada em técnicas de tratamento que objetivem reparo do complexo dentino-pulpar e/ou periapical. (AU)

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

FERNANDES, CELIO JUNIOR DA COSTA; CASSIANO, ANA FLAVIA BALESTRERO; HENRIQUE-SILVA, FLAVIO; CIRELLI, JONI AUGUSTO; DE SOUZA, EDUARDO PEREIRA; COAGUILA-LLERENA, HERNAN; ZAMBUZZI, WILLIAN FERNANDO; FARIA, GISELE. Recombinant sugarcane cystatin CaneCPI-5 promotes osteogenic differentiation. TISSUE & CELL, v. 83, p. 10-pg., 2023-08-01. (20/09576-6, 16/08888-9, 19/21807-6, 17/05784-0, 18/24662-6)

Publicações acadêmicas

(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)

CASSIANO, Ana Flávia Balestrero. Efeito pró-osteogênico da cistatina recombinante de cana-de-açúcar CaneCPI-5 em células pulpares humanas. 2022. Dissertação de Mestrado - Universidade Estadual Paulista (Unesp). Faculdade de Odontologia. Araraquara Araraquara.