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Efeito de vesículas extracelulares sobre a diferenciação osteoblástica e a regeneração óssea induzida por células-tronco mesenquimais

Processo: 21/01499-5
Modalidade de apoio:Bolsas no Brasil - Doutorado
Vigência (Início): 01 de junho de 2021
Vigência (Término): 12 de janeiro de 2023
Área do conhecimento:Ciências da Saúde - Odontologia - Cirurgia Buco-maxilo-facial
Pesquisador responsável:Adalberto Luiz Rosa
Beneficiário:Gabriela Guaraldo Campos Tótoli
Instituição Sede: Faculdade de Odontologia de Ribeirão Preto (FORP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
Vinculado ao auxílio:19/08568-2 - Investigação do papel de vesículas extracelulares (VEs) na iniciação, propagação, regeneração e modelação da mineralização biológica, AP.TEM
Assunto(s):Medicina regenerativa   Vesículas extracelulares   Osteoblastos   Regeneração óssea   Células-tronco mesenquimais   Terapia baseada em transplante de células e tecidos   Proteínas morfogenéticas ósseas   Expressão gênica   Inativação gênica
Palavra(s)-Chave do Pesquisador:Células-tronco | diferenciação osteoblática | osteoblastos | regeneração óssea | terapia celular | vesículas extracelulares | Medicina Regenerativa

Resumo

As vesículas extracelulares (EVs) são parte de sofisticados mecanismos de comunicação entre células que são relevantes na Medicina Regenerativa baseada na terapia celular com Células-Tronco Mesenquimais (CTMs), uma vez que estas células produzem e liberam EVs para o meio extracelular. Este estudo testará a hipótese de que EVs combinadas com CTMs induzem a regeneração óssea de defeitos criados em calvárias de ratos e por favorecer a diferenciação osteoblástica das principais células envolvidas nesse processo, CTMs e osteoblastos (OBs), por meio da modulação das vias de sinalização de proteínas ósseas morfogenéticas (BMPs), Wnt e Integrinas (ITGs). Para isso, EVs derivadas de CTMs serão obtidas por ultracentrifugação e caracterizadas por tamanho, morfologia e expressão proteica de marcadores de EVs. Para avaliar os efeitos das EVs na diferenciação osteoblástica de CTMs e OBs serão realizados experimentos para determinar a internalização de EVs por CTMs e OBs, a expressão gênica de marcadores osteoblásticos e atividade de fosfatase alcalina. A participação das vias de sinalização BMPs, Wnt e ITGs será avaliada por meio de expressão gênica de um painel de genes envolvidos nestas vias e silenciamento dos genes mais expressos. A eficácia da terapia baseada na injeção local de CTMs combinadas com EVs na formação de tecido ósseo em defeitos de calvárias de ratos será avaliada por meio de microtomografia e análise histológica. (AU)

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