Avaliação da atividade citotóxica de células T CD4+ sobre oligodendrócitos na Esclerosa Múltipla

• Processo: 20/15500-2
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado Direto
• Data de Início da vigência: 01 de junho de 2021
• Data de Término da vigência: 01 de setembro de 2025
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Imunologia - Imunologia Celular
• Pesquisador responsável: Alessandro dos Santos Farias
• Beneficiário: Natália Munhoz Alves
• Instituição Sede: Instituto de Biologia (IB). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Campinas , SP, Brasil
• Bolsa(s) vinculada(s): 23/14736-0 - Caracterização do perfil citotóxico de linfócitos T CD4+ na esclerose múltipla, BE.EP.DD
• Assunto(s): Autoimunidade Citotoxicidade Linfócitos T CD4-positivos Células precursoras de oligodendrócitos Esclerose múltipla
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Esclerose Múltipla | Linfócitos T CD4 citotóxicos | Oligodendrócitos | Autoimunidade

Resumo

A Esclerose Múltipla (EM) é uma doença inflamatória e autoimune do Sistema Nervoso Central (SNC). A atividade citotóxica de linfócitos T tem sido descrita como um mecanismo efetor para o desenvolvimento da EM. Ademais, foi demonstrado que a presença de células T CD4+ citotóxicas (CD4_CTLs) impulsiona a progressão da EM e que essas células contribuem para as lesões de EM ao direcionarem sua citotoxicidade aos oligodendrócitos. Neste contexto, nosso grupo demonstrou que as CD4_CTLs induzem apoptose em tecido cerebral saudável no modelo experimental. No entanto, não está claro se tal atividade citotóxica é induzida pela interação direta de CD4_CTLs e oligodendrócitos ou se essas células interagem com células apresentadoras de antígenos locais, liberando moléculas citotóxicas no SNC. Deste modo, nosso objetivo é avaliar a atividade citotóxica direta de células T CD4+ sobre oligodendrócitos durante a EM. Para isso, células mononucleares do sangue periférico (PBMCs) isoladas de pacientes com EM e controles saudáveis (HC) serão reprogramadas em células-tronco pluripotentes (iPSCs) e, em seguida, diferenciadas em células precursoras de oligodendrócitos (OPCs). Posteriormente, estas OPCs serão co-cultivadas com CD4_CTLs previamente isoladas do mesmo paciente/HC. As culturas serão tratadas com inibidores de moléculas citotóxicas e avaliadas quanto à indução de apoptose. Posteriormente, células T CD4+ naive serão isoladas de PBMCs de HC e diferenciadas em iCD4_CTLs. Para avaliar sua atividade citotóxica, as iCD4_CTLs serão co-cultivadas com as OPCs derivadas de iPSC, na presença de vários bloqueadores de moléculas citotóxicas e avaliadas quanto à indução de apoptose. Com base no estudo proposto, nosso objetivo é elucidar a interação entre CD4_CTLs e oligodendrócitos durante o desenvolvimento da EM, bem como estabelecer um modelo in vitro para diferenciação e estudo de CD4_CTLs. (AU)