Avaliação da expressão da mutação V595E do Gene BRAF na urina de cães com Carcinoma Urotelial de Bexiga por qPCR

• Processo: 21/00922-1
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de julho de 2021
• Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2021
• Área de conhecimento: Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Patologia Animal
• Pesquisador responsável: Renee Laufer Amorim
• Beneficiário: Tatiana Adelino Santos
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia (FMVZ). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Botucatu. Botucatu , SP, Brasil
• Assunto(s): Biologia molecular Doenças dos animais Neoplasias da bexiga Reação em cadeia da polimerase via transcriptase reversa quantitativa (qRT-PCR) Cães
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Biologia molecular | cão | carcinoma de células transicionais | Neoplasia | Biologia Molecular

Resumo

O carcinoma urotelial de bexiga ou de células transicionais é a neoplasia mais frequente no trato urinário dos cães. É uma neoplasia considerada invasiva e que pode apresentar metástases. O diagnóstico definitivo ocorre tardiamente, com limitações quanto às técnicas de coleta de amostras. Recentemente a mutação V595E do gene BRAF foi indicada como um marcador diagnóstico presente na urina, detectada por PCR Digital, teste com a vantagem do diagnóstico não invasivo. O objetivo desse estudo é avaliar a eficácia da qPCR para detecção da mutação V595E do gene BRAF em amostras de urina de cães com Carcinoma Urotelial de Bexiga. Para isso, as amostras de urina serão coletadas de animais com suspeita de carcinoma urotelial, por meio de história clínica e exame ultrassonográfico, além de confirmação por exame histopatológico por biopsia. A amostra de urina será mantida congelada por até 24 horas depois da coleta. Em seguida, será realizada a extração do DNA e proceder-se-á com a qPCR para a identificação e quantificação da mutação, confirmada por sequenciamento Sanger. O projeto proposto, em potencial, gerará resultados que contribuirão na melhoria do diagnóstico para cães com suspeita clínica de carcinoma urotelial de bexiga, por ser um método não invasivo, preciso, de fácil realização e um possível menor custo. Com isso, também se maximizamas chances de diagnóstico precoce e subsequente terapia. Os dados serão compilados, tabulados e avaliados com testes estatísticos paramétricos e não paramétricos. O projeto em pauta desenvolverá um produto técnico que poderá ser oferecido aos clínicos de pequenos animais.(AU)