Treinamento técnico em cruzamentos e protocolos de genotipagem de camundongos geneticamente modificados

• Processo: 21/11108-3
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Programa Capacitação - Treinamento Técnico
• Vigência (Início): 01 de outubro de 2021
• Vigência (Término): 30 de setembro de 2023
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Fisiologia - Fisiologia de Órgãos e Sistemas
• Pesquisador responsável: William Tadeu Lara Festuccia
• Beneficiário: Natalia Corte Bezerra
• Instituição Sede: Instituto de Ciências Biomédicas (ICB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 20/04159-8 - Biologia e envolvimento de mTORC2 e mTORC1 no desenvolvimento da esteatose hepática e progressão para esteatohepatite e hepatocarcinoma, AP.TEM
• Assunto(s): Metabolismo
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: camundongos geneticamente modificados | sistema cre-lox | Metabolismo

Resumo

O estudo da função de genes implica na realização de experimentos de ganho e perda de função destes in vivo e in vitro. Camundongos geneticamente modificados são ferramentas bastante utilizadas em estudos de fisiologia molecular pela facilidade de deletar genes de interesse em células específicas utilizando os sistemas Cre-Lox e Crispr/Cas, bem como, grande disponibilidade de linhagens e baixo custo de manutenção. Neste projeto nós iremos utilizar camundongos geneticamente modificados com deleção de Pten, Rictor e Raptor em hepatócitos e células mielóides com o objetivo de estudar o envolvimento de mTORC2 e mTORC1 no desenvolvimento da NAFLD. Para tanto, estamos requisitando umaBolsa de Treinamento Técnico para um estudante de ensino médio que será responsável pela genotipagem, desmame, controle de background, formação de casais, reprodução e manutenção das colônias de camundongos geneticamentemodificados. Para isto, o bolsista receberá treinamento em genética, manutenção e organização de colônias de camundongos, sistema Cre-lox e técnicas de biologia molecular como extração e análise de DNA por PCR, desenho de primers, eletroforese, manuseio dos animais, anestesia e identificação. O bolsista irá auxiliar também os pós-graduandos nos protocolos experimentais, com a avaliação semanal do peso corporal e ingestão alimentar. O suporte deste bolsista será fundamental para a geração e manutenção das colônias de camundongos geneticamente modificados que são essenciais para a execução com sucesso deste projeto de pesquisa.