Implicações do glifosato sobre a Doença Hepática Gordurosa associada ao metabolismo em camundongos: papel dos fatores de transcrição NRF2, p65, SREBP1

• Processo: 21/07954-6
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de outubro de 2021
• Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2022
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Medicina - Anatomia Patológica e Patologia Clínica
• Pesquisador responsável: Guilherme Ribeiro Romualdo
• Beneficiário: Ana Carolina Sprocatti dos Santos
• Instituição Sede: Instituto de Biociências (IBB). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Botucatu. Botucatu , SP, Brasil
• Assunto(s): Anatomia patológica Estresse oxidativo Fígado gorduroso Glifosato Herbicidas In vivo Fatores de transcrição Técnicas histológicas Morfometria Immunoblotting
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Camundongos C57BL | Esteatohepatite | Esteatose Hepática | Fator de transcrição | glifosato | herbicida | 6J | Toxicologia Patológica

Resumo

A doença hepática gordurosa associada ao metabolismo (do inglês, "metabolic-associated fatty liver disease", MAFLD), intrinsecamente associada à diabetes e à obesidade, acomete 25% da população mundial. A MAFLD também está relacionada o consumo de dieta rica em ácidos graxos saturados e carboidratos simples. Sua patogênese envolve o desequilíbrio no metabolismo de lipídios, o aumento da inflamação e do estresse oxidativo hepático, processos associados à desregulação dos fatores transcrição SREBP1, NF-ºB (p65) e Nrf2, respectivamente. Já o herbicida glifosato (N-(fosfonometil) glicina) é amplamente utilizado na agricultura e seus resíduos são frequentemente identificados em alimentos. Esse herbicida já demonstrou efeitos pró-oxidantes, lipogênicos e/ou inflamatórios hepáticos em estudos pré-clínicos, em doses abaixo dos limites toxicológicos adotados por agências governamentais. Assim, será avliado se a administração do herbicida glifosato promove a MAFLD em modelo nutricional in vivo. Especificamente, avaliaremos a implicações desse herbicida sobre os níveis hepáticos de NF-ºB (p65), Nrf2 e SREBP1, diretamente relacionados com a patogênese da MAFLD. Para tanto, será estabelecido modelo de MAFLD em camundongos machos C57BL/6J (n=10/grupo), fornecendo-se dieta hiperlipídica (30% de banha de porco, e 0.2% de colesterol), contendo 20% de sacarose e solução rica em açúcares (23,1 g/L de frutose e 18,9 g/L de glicose) por 6 meses. Concomitantemente, os animais receberão glifosato (0,05, 5 ou 50 mg/kg/dia por gavagem (5x/semana). As doses foram baseadas nos valores do Ingestão Diária Aceitável (IDAs) ou no No Observed Adverse Effect Level (NOAEL) das agências regulamentadoras europeia/americana. Será calculada a curva glicêmica (tanto após 3, quanto 6 meses) e o soro será obtido para análises bioquímicas (alanina amino transferase, triglicérides e colesterol). Amostras hepáticas serão obtidas para análises histológicas, incluindo a avaliação do grau de MAFLD (H&E), morfometria de colágeno (Sirius red) e lipídios (Oil red) e reação de imunoistoquímica para Ki-67 (i.e., proliferação), CD68 (i.e., marcador de macrófagos) e ±-SMA (i.e., marcador de células estreladas ativas). Outras amostras hepáticas serão submetidas a immunoblotting para p65, Nrf2 e SREBP1 e determinação de hidroperóxidos de lipídio, além das atividades das enzimas antioxidantes catalase, superóxido dismutase, glutationa peroxidase e glutationa-S transferase.(AU)

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

ROMUALDO, GUILHERME R.; VALENTE, LETICIA CARDOSO; SPROCATTI, ANA CAROLINA; BACIL, GABRIEL PRATA; DE SOUZA, ISADORA PENEDO; RODRIGUES, JOSIAS; RODRIGUES, MARIA APARECIDA MARCHESAN; VINKEN, MATHIEU; COGLIATI, BRUNO; BARBISAN, LUIS FERNANDO. Western diet-induced mouse model of non-alcoholic fatty liver disease associated with metabolic outcomes: Features of gut microbiome-liver-adipose tissue axis. NUTRITION, v. 103-104, p. 12-pg., 2022-10-03. (21/07954-6, 20/00377-0, 20/01078-7)