Reprogramação metabólica de macrófagos humanos THP-1 infectados com Leishmania mediada por microRNA

• Processo: 21/09111-6
• Modalidade de apoio: Bolsas no Exterior - Estágio de Pesquisa - Doutorado Direto
• Data de Início da vigência: 01 de dezembro de 2021
• Data de Término da vigência: 30 de novembro de 2022
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Parasitologia - Protozoologia de Parasitos
• Pesquisador responsável: Lucile Maria Floeter-Winter
• Beneficiário: Juliane Cristina Ribeiro Fernandes
• Supervisor: Coral Barbas
• Instituição Sede: Instituto de Biociências (IB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Instituição Anfitriã: Universidad CEU San Pablo, Madrid, Espanha
• Vinculado à bolsa: 17/21906-9 - Papel de miRNAs na regulação da via de produção de poliaminas/NO em macrófagos derivados de THP-1 infectados com Leishmania amazonensis, BP.DD
• Assunto(s): Metabolômica Metabolismo Macrófagos Regulação da expressão gênica MicroRNAs Leishmania mexicana
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Leishmania amazonensis | metabolismo | Metabolomica | MicroRNAs | Regulação da expressão gênica | Interação Parasita-Hospedeiro

Resumo

A metabolômica emergiu como uma ferramenta importante para caracterizar o fenótipo metabólico de macrófagos que, combinado com abordagens genéticas, permite decifrar a regulação da expressão gênica em seu último fenótipo, o metabolismo. A reprogramação metabólica durante a infecção por Leishmania foi extensivamente estudada em macrófagos murinos, mas as diferenças para a imunologia humana têm sido mais estudadas atualmente. A Leishmania possui diversos mecanismos para modular o metabolismo e expressão gênica do macrófago favorecendo sua sobrevivência e replicação no ambiente hostil do fagolisossomo. Pequenos RNAs regulatórios não codificantes, os microRNAs, são reguladores globais da expressão gênica em macrófagos modulando mRNAs alvo. Nós mostramos anteriormente o mmu-miR-294 tendo como alvo o mRNA da óxido nítrico sintase 2 (Nos2) em macrófagos murinos infectados com L. amazonensis. Macrófagos humanos THP-1 regulam positivamente o hsa-miR-373, homólogo ao mmu-miR-294, compartilhando a mesma sequência 5' seed. Ainda, os miR-372 e miR-520d também contém essa sequência seed e estão regulados positivamente em resposta à infecção por L. amazonensis, dessa forma tendo como alvo mRNAs similares. Para entender o poder efetor da regulação por miRNAs controlando a função do macrófago, nós construímos uma linhagem de macrófago que expressa uma esponja de miRNAs impedindo a ação de miR-373 em seus alvos. Comparar o perfil metabólico dessa linhagem comparado à linhagem não modificada THP-1 pode prover um panorama geral do papel de miR-372/373/520d na modulação do metabolismo do macrófago durante a infecção por L. amazonensis, em conjunto com análises de expressão gênica e técnicas de validação da interação miRNA-mRNA. (AU)