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Mapeamento de variantes genômicos e epigenômicos do SARS-CoV-2 no Estado de São Paulo e alterações no transcriptoma do sangue associadas à vacina ChAdOx1 nCoV-19 em voluntários da UNIFESP

Processo: 21/13111-1
Modalidade de apoio:Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
Vigência (Início): 01 de dezembro de 2021
Vigência (Término): 14 de agosto de 2022
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Microbiologia - Microbiologia Aplicada
Pesquisador responsável:Luiz Mário Ramos Janini
Beneficiário:João Henrique Coelho Campos
Instituição Sede: Escola Paulista de Medicina (EPM). Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus São Paulo. São Paulo , SP, Brasil
Vinculado ao auxílio:20/08943-5 - Investigação de elementos induzidos pela resposta vacinal nos indivíduos submetidos aos testes clínicos com a vacina ChAdOx1 nCOV-19, AP.TEM
Assunto(s):Virologia   Epigenômica   Proteção cruzada   Resposta inflamatória   Transcriptoma   Imunidade   Genoma viral   Análise de sequência de RNA   Vacina ChAdOx1 nCoV-19   SARS-CoV-2   Betacoronavirus   COVID-19
Palavra(s)-Chave do Pesquisador:Covid-19 | Epigenômica | SARS-CoV-2 | Sequenciamento direto do RNA | Transcriptoma | Vacina ChAdOx1 nCoV-19 | Virologia

Resumo

Esta proposta é parte do projeto temático FAPESP (20/08943-5) em andamento. O bolsista de PD irá atuar diretamente nos subprojetos 3 e 5 descritos abaixo. O projeto temático consiste no desdobramento do projeto internacional com as 2.000 amostras de voluntários do teste Oxford-UNIFESP da vacina ChAdOx1 nCoV-19. O objetivo é estabelecer um repositório para toda a comunidade acadêmica do Estado de São Paulo e utilizar as amostras para análises complementares às "Medidas de resultados primários e secundários", conforme descrito em ClinicalTrials.gov (NIH, ID NCT04400838). O projeto geral é coordenado pelo Prof. Luiz Mario R. Janini, do Departamento de Microbiologia, Imunologia e Parasitologia da Escola Paulista de Medicina/EPM/UNIFESP. Os subprojetos que integram o projeto temático são: (1) estabelecimento de um biorrepositório das amostras de voluntários antes e depois da vacinação; (2) avaliação da capacidade de neutralização de soros de indivíduos vacinados contra cepas SARS-CoV-2 circulantes específicas do Brasil e avaliação da imunidade cruzada; (3) caracterização de isolados brasileiros de SARS-CoV-2 para avaliar o potencial de escape da vacina; (4) análise dos perfis de citocinas em soros de voluntários, antes e após a vacinação, para avaliar a resposta inflamatória e efeitos associados; (5) análise dos transcriptomas sanguíneos de voluntários antes e após a vacinação e (6) análise o perfil de secretoma no sangue total dos voluntários, antes e após a vacinação, para avaliar o tipo de resposta imune predominante e possível "priming" por outro coronavírus. Os objetivos específicos deste projeto se enquadram nos subprojetos 3 e 5, para análise genética e epigenética do SARS-CoV-2 e dos epitranscriptomas dos voluntários imunizados com a vacina ChAdOx1 nCoV-19. Para estas análises utilizaremos o sequenciamento direto do RNA, tanto para os genomas virais quando para os transcriptomas dos voluntários da vacina. Nosso grupo é pioneiro no Brasil no sequenciamento direto do RNA (ribogenômica) para mapeamento de diferenças genéticas e epigenéticas do SARS-CoV-2. Já temos resultados publicados com as sequências de SARS-CoV-2 e já estamos em fase de análise do epitranscritoma das células infectadas. Nosso objetivo é testar a hipótese de que além da variação genética entre variantes do SARS-CoV-2 existem variações epigenéticas. Ainda, pretendemos mostrar a variação da expressão de genes humanos, antes e depois da vacinação, e suas possíveis alterações epigenéticas, tais como a metilação m6A. Estas informações podem contribuir para entender, com mais detalhes, os mecanismos de escape das vacinas e do desafio dos imunizados vacinais com diferentes variantes. A longo prazo, a ideia é utilizar a estrutura aqui montada para estabelecer o laboratório de ribogenômica da UNIFESP para o estudo, sem a utilização de cDNA, de vírus com genomas exclusivamente de RNA, tais como os causadores da Influenza, Zika, Dengue e Poliomielite e Sarampo. (AU)

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Publicações científicas
(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)
CAMPOS, JOAO H. C.; AGUILAR, ANA C. R.; ANTONELI, FERNANDO; TRUZZI, GISELLE; BRIONES, MARCELO R. S.; FERREIRA, RENATA C.; COELHO, FERNANDO M. S.. Whole-genome analysis of monozygotic Brazilian twins discordant for type 1 narcolepsy: a case report. BMC Neurology, v. 22, n. 1, p. 8-pg., . (20/08943-5, 21/13111-1)
CAMPOS, JOAO H. C.; ALVES, GUSTAVO V.; MARICATO, JULIANA T.; BRACONI, CARLA T.; ANTONELI, FERNANDO M.; JANINI, LUIZ MARIO R.; BRIONES, MARCELO R. S.. The epitranscriptome of Vero cells infected with SARS-CoV-2 assessed by direct RNA sequencing reveals m6A pattern changes and DRACH motif biases in viral and cellular RNAs. FRONTIERS IN CELLULAR AND INFECTION MICROBIOLOGY, v. 12, p. 19-pg., . (20/08943-5, 21/13111-1)

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