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Caracterização do papel do fator geral de splicing CWC24 em pré-mRNA em Saccharomyces cerevisiae

Processo: 21/14137-4
Modalidade de apoio:Bolsas no Brasil - Doutorado Direto
Vigência (Início): 01 de janeiro de 2022
Situação:Interrompido
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
Pesquisador responsável:Carla Columbano de Oliveira
Beneficiário:Moises Ricardo de Almeida Barros
Instituição Sede: Instituto de Química (IQ). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
Vinculado ao auxílio:20/00901-1 - Controle pós-transcricional de expressão gênica: processamento de pré-rRNA, degradação de mRNA, splicing e montagem de snoRNPs em Saccharomyces cerevisiae, AP.TEM
Bolsa(s) vinculada(s):23/16763-5 - Caracterização do papel do fator de splicing Cwc24 em pré-mRNA em Saccharomyces cerevisiae, BE.EP.DD
Assunto(s):Processamento de RNA   Precursores de RNA   Spliceossomos   Saccharomyces cerevisiae
Palavra(s)-Chave do Pesquisador:Cwc24 | pré-mRNA | spliceossomo | splicing | Splicing

Resumo

Todos RNAs transcritos nas células de eucariotos passam por etapas de maturação. Uma das etapas pelas quais os pré-mRNAs passam é o processo de splicing, onde as sequências não codificadoras (íntrons) são removidas e as codificadoras (exons) unidas. Para que este processo ocorra, duas reações de transesterificação são necessárias, que por sua vez são mediadas por um complexo multimérico denominado spliceossomo, composto por cinco snRNPs (small nuclear ribonucleoproteins), U1, U2, U4, U5 e U6, e várias proteínas. A montagem do spliceossomo ocorre durante o processo de splicing, sendo necessárias várias mudanças conformacionais dos subcomplexos, para que ocorram duas reações de transesterificação durante o splicing. Essas mudanças conformacionais e de composição do complexo são mediadas pela ação de helicases e outras ATPases, e consequentemente, envolvem gasto de ATP. Além dos complexos de snRNPs e ATPases, o splicing de pré-mRNAs requer o complexo NTC (NineTeen Complex), que participa das duas reações de transesterificação, com sua composição mudando ao longo do processo. Dentre as proteínas que compõem o complexo NTC destacamos Cwc24, que se liga transientemente ao spliceossomo e tem como função interagir com a extremidade 5´ do íntron para prevenir a primeira reação de transesterificação prematura, o que por sua vez levaria a um mRNA não funcional. Desta forma, neste projeto é proposta a caracterização dos mecanismos que levam à associação e desassociação de Cwc24 do spliceossomo. (AU)

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