Desvendando o papel biológico da glicosilação de proteínas do T. cruzi

• Processo: 22/00796-9
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de março de 2022
• Data de Término da vigência: 10 de novembro de 2024
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Parasitologia - Protozoologia de Parasitos
• Pesquisador responsável: Giuseppe Palmisano
• Beneficiário: Lays Adrianne Mendonça Trajano Silva
• Instituição Sede: Instituto de Ciências Biomédicas (ICB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 18/15549-1 - Modificações pós-traducionais nos processos biológicos e no diagnóstico da Doença de Chagas: novas abordagens metodológicas e implicações biológicas, AP.JP2
• Assunto(s): Proteína 9 associada à CRISPR Repetições palindrômicas curtas agrupadas e regularmente espaçadas Glicosilação Trypanosoma cruzi Biologia molecular
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Cas9 | Crispr | glicosilação | Trypanossoma cruzi | Biologia molecular

Resumo

A sobrevivência do parasita Trypanosoma cruzi durante o ciclo celular e estabelecimento da infecção depende de processos específicos que garante a sua adaptação nas mais variadas condições. Neste contexto, modificações pós traducionais, como a Glicosilação, vem sendo amplamente estudadas principalmente por conter proteínas que podem ser utilizadas como biomarcadores para a Doença de Chagas. Em T. brucei genes da oligossacariltransferase (STT3A e STT3B), presentes na maquinaria de N-glicosilação, foram identificados e o silenciamento dos genes TbSTT3A e TbSTT3B demonstraram o consequente desaparecimento da maioria dos N-glicanos paucimanose/complexo ou oligomanose, levando a diminuição no crescimento dos parasitos em cultura. No entanto, em T. cruzi a função desses genes permanece não caracterizadas. A ampla utilização da ferramenta CRISPR/Cas9, tem possibilitado avanços no estudo funcional de proteínas, principalmente em T. cruzi. A fim de entender a glicosilação em T. cruzi, o objetivo deste projeto é identificar os parálogos e caracterizar a função da oligossacariltransferase (OST) em T. cruzi, utilizando a técnica de CRISPR/Cas9. A geração dos parasitos nocaute irá possibilitar a avaliação da metaciclogênese em formas epimastigotas, além da infectividade em células LLC-MK2 das formas tripomastigotas após o nocaute. Os resultados obtidos irão contribuir com o entendimento da função da STT3 no processo de N-glicosilação do T. cruzi e sua relevância no estabelecimento da infecção.