| Processo: | 21/13096-2 |
| Modalidade de apoio: | Bolsas no Brasil - Doutorado |
| Data de Início da vigência: | 01 de abril de 2022 |
| Data de Término da vigência: | 31 de janeiro de 2026 |
| Área de conhecimento: | Ciências da Saúde - Odontologia - Materiais Odontológicos |
| Pesquisador responsável: | Josimeri Hebling Costa |
| Beneficiário: | Igor Paulino Mendes Soares |
| Instituição Sede: | Faculdade de Odontologia (FOAr). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Araraquara. Araraquara , SP, Brasil |
| Bolsa(s) vinculada(s): | 23/04465-0 - Scaffolds fibrilares carregados com flavonoide para modular a resposta inflamatória e a dentinogênese em terapia pulpar vital: análises físico-químicas e biológicas, BE.EP.DR |
| Assunto(s): | Odontologia regenerativa Flavonoides Anti-inflamatórios Capeamento da polpa dentária Dentinogênese Expressão gênica Regeneração tecidual guiada Lipopolissacarídeos Escherichia coli |
| Palavra(s)-Chave do Pesquisador: | Anti-inflamatórios | capeamento da polpa dentária | expressão gênica | flavonóides | Regeneração tecidual guiada | Odontologia Regenerativa |
Resumo A reversão do ambiente pró-inflamatório em pró-regenerativo permanece um desafio em procedimentos de Terapia Pulpar Vital (TPV). Biomateriais que mimetizam a matriz extracelular nativa têm sido amplamente explorados para regeneração endodôntica e a sua funcionalização com moléculas bioativas os torna capazes de modular a dentinogênese em ambientes inflamatórios degenerativos, ou seja, em condições pulpares adversas. Flavonoides (compostos fenólicos naturais) apresentam várias atividades biológicas/farmacológicas bem estabelecidas, incluindo propriedades antioxidante, anti-inflamatória, antimicrobiana e indutora da diferenciação de células progenitoras. Essas propriedades tornam essas moléculas candidatas ideais para aplicação em terapias regenerativas. Considerando a escassez de evidência científica quanto a seus efeitos bioativos sobre células pulpares humanas, especialmente sob condições inflamatórias, investigações são necessárias para que esses compostos possam ser utilizados no tratamento de pulpopatias. A liberação controlada de um flavonoide bioativo, especialmente nos primeiros dias, a partir de um scaffold capaz de estimular processos de diferenciação celular e biomineralização pode ser uma alternativa interessante para modular a dentinogênese em células pulpares humanas em condições inflamatórias, culminando em prognósticos mais favoráveis para procedimentos de TPV. Portanto, este projeto terá como objetivo avaliar o efeito de flavonoides sobre o metabolismo de células pulpares humanas (HDPCs) cultivadas na ausência e presença de estímulo inflamatório, e associar a molécula com maior efeito bioativo a scaffolds fibrilares incorporados com nano-hidroxiapatita (nHA) para modulação da dentinogênese em ambiente inflamatório degenerativo. No Estudo 1, a citocompatibilidade e bioatividade de diferentes concentrações dos flavonoides quercetina, hesperetina e taxifolina serão avaliadas sobre HDPCs isoladas de terceiros molares cultivadas na ausência e presença de lipopolissacarídeos (LPS) de E. coli. No Estudo 2, serão abordadas estratégias de funcionalização de scaffolds fibrilares de policaprolactona (PCL) e PCL/nHA com o flavonoide/concentração com melhor desempenho no Estudo 1. Os scaffold funcionalizados serão avaliados de acordo com propriedades físico-químicas, bioatividade sobre HDPCs e modulação da dentinogênese in situ usando discos de dentina humana. No Estudo 3, scaffolds fibrilares de PCL e PCL/nHA com liberação do flavonoide serão avaliados quanto ao potencial bioativo em ambiente inflamatório degenerativo (com LPS) e usando modelo in vitro de capeamento pulpar direto com cultura 3D de HDPCs e discos de dentina humana. Como propriedades físico-químicas, serão avaliadas morfologia e composição (MEV/EDS e FTIR), energia livre de superfície, perfil de liberação do flavonoide (UV-Vis), alteração de massa, liberação de cálcio (o-cresolftaleína) e modulação de pH. Como análises biológicas, serão realizados ensaios de viabilidade celular (alamarBlue/LiveDead), adesão/espalhamento (F-actina), potencial quimiotático (Wound Healing), expressão gênica de mediadores inflamatórios, dentinogênicos/osteogênicos e de integrinas (RT-qPCR), modulação do estresse oxidativo intracelular (Sonda Carboxy-H2DCFDA), produção de óxido nítrico (Griess), síntese de proteína total (Lowry), atividade de fosfatase alcalina (ALP; Timolftaleína), síntese de sialofosfoproteína dentinária (DSPP; Imunofluorescência) e formação de matriz mineralizada (Alizarin Red). O número de repetições para cada protocolo foi baseado em estudo prévios e será calculado de acordo com dados obtidos na primeira ocasião experimental, podendo ser ajustado para cada protocolo. Os dados serão submetidos a análises estatísticas específicas após verificação do tipo de distribuição amostral (Shapiro-Wilk) e homogeneidade de variâncias (Levene). Inferências estatísticas serão feitas considerando o nível de significância de 5%. | |
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