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Análise do status de inativação do cromossomo X em blastóides humanos

Processo: 22/02096-4
Modalidade de apoio:Bolsas no Exterior - Estágio de Pesquisa - Mestrado
Vigência (Início): 15 de agosto de 2022
Vigência (Término): 14 de fevereiro de 2023
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Genética - Genética Humana e Médica
Pesquisador responsável:Lygia da Veiga Pereira
Beneficiário:Ana Elisa Ribeiro Orsi
Supervisor: Jun Wu
Instituição Sede: Instituto de Biociências (IB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
Local de pesquisa: University of Texas Southwestern Medical Center, Dallas (UT Southwestern), Estados Unidos  
Vinculado à bolsa:20/16612-9 - Análise da expressão gênica de embriões humanos pré-implantação para o desenvolvimento de estratégia de manutenção do estado epigenético da mórula, BP.MS
Assunto(s):Embriogênese   Embrião   Inativação do cromossomo X   Expressão gênica   Células-tronco   Blastocisto   Colaboração científica
Palavra(s)-Chave do Pesquisador:Blastóides | Desenvolvimento embrionário humano | inativação do cromossomo X | Células-tronco

Resumo

Em mamíferos placentários, a inativação de cópias extras do cromossomo X é essencial para a viabilidade de embriões fêmeas. Apesar de ser bem descrito em camundongos, o processo de inativação do cromossomo X (ICX) em embriões humanos pré-implantação ainda não foi totalmente elucidado. Devido às questões éticas e dificuldades técnicas associadas ao uso de embriões humanos em pesquisas, o desenvolvimento de um modelo baseado em células-tronco do blastocisto para uso no estudo da compensação de dose em embriões é desejável. Enquanto células-tronco pluripotentes (PSCs) primed não são adequadas para essa aplicação, PSCs humanas naive apresentam dois cromossomos X ativos e têm o potencial de gerar células do trofoblasto e hipoblasto extra-embriônicos. Recentemente, hPSCs naive foram utilizadas na geração de blastóides, estruturas tridimensionais similares ao blastocisto humano. Porém, o status de ICX durante conversão e manutenção dessas estruturas não foi avaliado. Assim, nós propomos uma colaboração com o Dr. Jun Wu e seu grupo no Centro Médico Universidade do Texas Southwestern, o primeiro a gerar blastóides humanos. Inicialmente, geraremos e manteremos em cultura hPSCs naive com cariótipos XX e XY. Depois, essas células serão utilizadas na geração de blastóides. Durante o processo, o status de ICX e expressão de genes ligados ao cromossomo X serão avaliados por RNA-FISH, qPCR e/ou single-cell RNA-sequencing. Além de contribuir para a elucidação do processo de ICX em embriões humanos, o projeto contemplará a capacitação da aluna, que poderá estabelecer a tecnologia de blastóides humanos em laboratórios brasileiros. (AU)

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Publicações científicas
(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)
PINZON-ARTEAGA, CARLOS A.; WANG, YINJUAN; WEI, YULEI; ORSI, ANA E. RIBEIRO; LI, LEIJIE; SCATOLIN, GIOVANNA; LIU, LIZHONG; SAKURAI, MASAHIRO; YE, JIANFENG; MING, HAO; et al. Bovine blastocyst-like structures derived from stem cell cultures. CELL STEM CELL, v. 30, n. 5, p. 14-pg., . (22/02096-4, 20/16612-9)

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