Identificação e validação de novos alvos moleculares de peptídeos anti-inflamatórios por meio de abordagens de proteômica por espectrometria de massas

• Processo: 22/01892-1
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
• Vigência (Início): 01 de maio de 2022
• Situação: Interrompido
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Acordo de Cooperação: GlaxoSmithKline
• Pesquisador responsável: Ana Marisa Chudzinski-Tavassi
• Beneficiário: Hellen Paula Valerio
• Instituição Sede: Instituto Butantan. Secretaria da Saúde (São Paulo - Estado). São Paulo , SP, Brasil
• Empresa Sede: Secretaria da Saúde (São Paulo - Estado). Instituto Butantan
• Vinculado ao auxílio: 20/13139-0 - Centro de Excelência na Descoberta de Novos Alvos, AP.PCPE
• Bolsa(s) vinculada(s): 23/04104-7 - Mapa subcelular dinâmico do proteoma de condrócitos humanos sob indução de senescência, BE.EP.PD
• Assunto(s): Artrite Condrócitos Osteoartrite Proteômica Terapia de alvo molecular
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: alvos moleculares | Artrite | Condrócitos | Osteoartrite | proteômica | Quimioproteômica | Bioquimica

Resumo

O objetivo do projeto do CENTD é utilizar venenos, secreções e peptídeos derivados de venenos de animais como ferramentas para identificação e validação de novos alvos moleculares e vias de sinalização de doenças de base imuno-inflamatória. A descoberta de novos alvos moleculares pode ser útil no desenvolvimento racional de novas terapias e fármacos. Para atingir esse objetivo, o nosso centro implementou e caracterizou distintos modelos de inflamação (condrócitos, macrófagos, sinoviócitos e células neuronais), tendo identificado cinco peptídeos derivados de venenos de animais que apresentam efeitos anti-inflamatórios e citoprotetores. O envelhecimento de condrócitos está associado com a degeneração articular da cartilagem e é observada na artrite reumatóide e na osteoartrite. Tratamentos mais específicos e eficazes são necessários para essas doenças e é bem descrito que citocinas pró-inflamatórias tem um papel fundamental na progressão dessas doenças. Portanto, encontrar novos alvos moleculares que melhorem o tratamento ou levem ao desenvolvimento de novos fármacos para doenças de base inflamatória é de grande interesse. A proteômica por espectrometria de massas é um método analítico versátil e poderoso que nós pretendemos utilizar para a descoberta e validação de novos alvos moleculares. Para isso, o nosso centro tem implementado abordagens de proteômica qualitativa e quantitativa label-free à identificação de proteínas e vias de sinalização que modulem os distintos modelos celulares tratados com os peptídeos de interesse. Além disso, para ter uma ideia das interações peptídeo-proteína que resultam nos efeitos anti-inflamatórios, o nosso centro tem aplicado métodos baseados em purificação por afinidade em extratos celulares tratados com os peptídeos de interesse e identificado proteínas que interagem especificamente com esses peptídeos. Portanto, esse projeto tem dois objetivos específicos: 1- utilizar quimioproteômica para identificar sistematicamente alvos específicos dos peptídeos de interesse em condrócitos primários e 2- validar condrócitos knockdown para os alvos identificados, utilizando proteômica quantitativa relativa e proteômica baseada no monitoramento de alvos específicos.