Eliminação do gene RASSF9 na linhagem de melanoma B16F0 através de CRISPR/Cas9

• Processo: 22/05193-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Vigência (Início): 01 de julho de 2022
• Vigência (Término): 30 de junho de 2023
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Morfologia - Citologia e Biologia Celular
• Pesquisador responsável: João Gustavo Pessini Amarante Mendes
• Beneficiário: Julia Souza e Costa
• Instituição Sede: Instituto de Ciências Biomédicas (ICB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Biologia tumoral Biologia celular Melanoma Proteína 9 associada à CRISPR Repetições palindrômicas curtas agrupadas e regularmente espaçadas In vivo Técnicas in vitro
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: B16F0 | Cas9 | Crispr | melanoma | Rassf9 | Biologia Tumoral

Resumo

O melanoma é o câncer originado pela transformação de melanócitos, sendo o mais letal entre os cânceres de pele. Pode ser dividido em quatro grupos dependendo da mutação presente, sendo mais incidentes alterações nas proteínas B-Raf e Ras. A proteína Ras está associada a diferentes cascatas de sinalização, regulando processos como proliferação, diferenciação, morfologia, apoptose. Os principais efetores de Ras na morte celular são membros da família RASSF (Ras-association Family). RASSF9 foi implicado na diferenciação dos queratinócitos e na homeostase dermal e, interessantemente, sua expressão pode ser induzida por exposição solar. Para estudar o papel de RASSF9 em melanomas, iremos eliminar a expressão deste gene na linhagem murina B16F0, através do sistema CRISPR/Cas9. Após seleção de linhagem estável transfectante (B16F0.R9KO), iremos avaliar o impacto da nossa manipulação no crescimento tumoral in vitro e in vivo, bem como na resistência a quimioterápicos. Finalmente, esta linhagem servirá como ferramenta para novos estudos sobre o papel de RASSF9 em vias bioquímicas intracelulares e outros aspectos da biologia tumoral.(AU)