Análise da interação entre os domínios SH2 da fosfolipase Cg, com a alça contendo a tirosina Y783 de ativação, e o impacto na ativação da PLCg por NGF

• Processo: 22/11236-4
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de novembro de 2022
• Data de Término da vigência: 31 de outubro de 2023
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Deborah Schechtman
• Beneficiário: Vinícius Pinheiro Biazotti
• Instituição Sede: Instituto de Química (IQ). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 19/06982-6 - Caracterização e desenvolvimento de novos moduladores das vias da TrkA e PKMzeta na dor inflamatória e crônica, AP.TEM
• Assunto(s): Fatores de crescimento neural
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: C-Sh2 | fosfolipase Cg | Ngf | N-Sh2 | PLCg | Y783 | Bioquímica

Resumo

Quando uma lesão tecidual é produzida no corpo humano, diversas são as formas de sinalização celular da dor. A de interesse de pesquisa do nosso grupo de laboratório é intermediada pela dimerização do receptor TrkA (Tropomiosina quinase A) e uma consequente cascata de reações até a despolarização neuronal, por meio da ativação do canal de cátions TRPV1. Neste contexto inflamatório, a primeira etapa é a secreção do Fator de crescimento neural (NGF) pelas células da região da lesão tecidual. Este composto leva à ativação do receptor TrkA, uma proteína de alta afinidade pelo NGF, a qual dimeriza-se ativando várias vias de sinalização. Dentre elas, a via da fosfolipase Cg (PLCg). Esta fosfolipase, quando fosforilada, cliva lipídeos da membrana, levando à ativação de um canal de cátions denominado TRPV1, levando o sinal para o sistema nervoso central. Estudos, realizados pelo nosso laboratório, concluíram que a inibição da interação entre a PLCg e o receptor dimerizado TrkA, por meio da utilização de um peptídeo mimético, derivado do sítio de interação da TrkA com a PLCg (TAT-pQYP), inibiu a interação e ativação da PLCg, bem como a nocicepção mecânica em um modelo inflamatório, demonstrando a importância da ativação da PLCg para a nocicepção. Portanto, tal resultado salientou ainda mais a importância do estudo da interação entre o receptor Tropomiosina quinase A e a PLC. A fosfolipase Cg contém dois domínios SH2: um N e um C. Propõe-se que o N-SH2 liga-se à TrkA, possibilitando a fosforilação da Y783 da PLCg, ao passo que o domínio C-SH2 da PLCg então se liga à Y783 fosforilada, o que causa uma mudança conformacional na lipase, ativando-a. Dessa forma, no presente projeto, visa-se estudar a afinidade dos domínios N e C-SH2 por um peptídeo contendo a Y783 fosforilada e se esse peptídeo também inibe a ligação da PLCg à TrkA e/ou inibe uma mudança conformacional/ativação da PLC, podendo inibir a nocicepção.Visamos, assim, o desenvolver um mecanismo de inibição mais específico para a PLCg, e analgésicos não-opioides de grande eficácia.