Caracterização de genes potencialmente envolvidos no metabolismo e transporte de ferro para o glicossomo de Leishmania amazonensis

• Processo: 22/04551-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de dezembro de 2022
• Data de Término da vigência: 31 de maio de 2026
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Parasitologia - Protozoologia de Parasitos
• Pesquisador responsável: Maria Fernanda Laranjeira da Silva
• Beneficiário: Romário Lopes Boy
• Instituição Sede: Instituto de Biociências (IB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Expressão gênica Imunolocalização Infecção Transporte de íons Virulência
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: expressão gênica | Imunolocalização | infeccao | Transportadores | transporte de ions | Virulência | Bioquímica, Biologia Celular e Biologia Molecular

Resumo

Os protozoários do gênero Leishmania são os agentes etiológicos das doenças conhecidas como leishmanioses que afetam milhões de pessoas. Esses organismos são parasitas que alternam entre o hospedeiro invertebrado e vertebrado onde são capazes de sobreviver e replicar nos macrófagos. Uma das condições críticas encontrada pela Leishmania no macrófago é a carência de nutrientes, entre estes o ferro. Já foi demonstrado que em Leishmania a privação de ferro induz a expressão de uma série de genes ainda não caracterizados. Os tripanossomatídeos possuem organelas exclusivas chamadas glicossomos que constituem uma das principais diferenças entre parasita e hospedeiro. Essas organelas compartimentalizam enzimas que utilizam ferro como cofator, no entanto a entrada de ferro na organela ainda não foi caracterizada. A partir da análise in silico de transcritos de L. amazonensis modulados pela privação de ferro, identificamos 11 genes com sinais de endereçamento ao glicossomo preditos e caracterizamos a localização subcelular de 5 destes genes com três ou mais domínios transmembrana preditos. Por imunofluorescência, demonstramos a compartimentalização glicossomal das proteínas codificadas por 2 destes genes em promastigotas superexpressores. Portanto, nosso objetivo é determinar o papel de destes 2 genes no metabolismo de ferro em Leishmania com a obtenção e caracterização fenotípica de parasitas nocaute destes genes pela estratégia de CRISPR/Cas9. A caracterização da função destes genes contribuirá na elucidação dos mecanismos envolvidos no transporte e metabolismo de ferro no glicossomo de Leishmania e poderá indicar novos alvos para o desenvolvimento de quimioterápicos para tratamento das leishmanioses.