Diferenciação de macrófagos por influência de vesículas extracelulares hipóxicas derivadas de células tumorais de mama

• Processo: 22/12307-2
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de fevereiro de 2023
• Data de Término da vigência: 31 de janeiro de 2024
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Heloisa Sobreiro Selistre de Araújo
• Beneficiário: Pedro Henrique Teixeira Bottaro
• Instituição Sede: Centro de Ciências Biológicas e da Saúde (CCBS). Universidade Federal de São Carlos (UFSCAR). São Carlos , SP, Brasil
• Assunto(s): Neoplasias mamárias Hipóxia Macrófagos Vesículas extracelulares Microambiente tumoral
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Câncer de mama | hipóxia | Macrófago | vesículas extracelulares | Microambiente tumoral

Resumo

Grande parte da massa total de um microambiente tumoral é composta por macrófagos recrutados, que podem atuar em respostas pró- ou anti-tumorais dependendo de sua interação com esse microambiente. Macrófagos do tipo M2 são essenciais aos processos metastáticos, contribuindo para um contexto pró-angiogênico e pró-invasivo. Em células tumorais, particularmente sob situações de estresse como a hipóxia, a comunicação entre células do microambiente é mediada por vesículas extracelulares (EVs), que podem incitar a diferenciação dos macrófagos associados ao tumor (TAMs). Como o câncer de mama triplo negativo é uma doença preponderante à população feminina brasileira, o aprofundamento dos conhecimentos básicos torna possível a identificação de novos alvos terapêuticos. Nesteprojeto, investigaremos a diferenciação de macrófagos mediada por vesículas extracelulareshipóxicas de células tumorais de mama. Utilizaremos as linhagens de monócito THP-1 e deadenocarcinoma mamário triplo negativo MDA-MB-231. Testaremos se diferenciação dos monócitos em macrófagos será induzida pela adição do meio condicionado contendo EVs isoladas das células tumorais cultivadas em hipóxia, com acompanhamento por microscopia óptica em tempo real. Como controle positivo de diferenciação, utilizaremos o tratamento com folbol-12-miristato-13-acetato (PMA). A fenotipagem dos macrófagos e monócitos será realizada por citometria de fluxo e RT-qPCR. Estudaremos a interação entre as duas linhagenspor ensaio de co-cultura e, para identificação de MMPs, realizaremos zimografia do sobrenadante dos ensaios celulares. Esperamos que haja adesão dos monócitos em co-cultura com maior ativação de MMP-9 e diferenciação celular em diferentes subtipos de macrófagos otimizada pelas vesículas extracelulares hipóxicas.