Caracterização bioquímica e funcional da enzima NAT10 de Leishmania

• Processo: 23/02323-3
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de março de 2023
• Data de Término da vigência: 03 de setembro de 2025
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Parasitologia - Protozoologia de Parasitos
• Pesquisador responsável: Nilmar Silvio Moretti
• Beneficiário: Gabriela Gomes Alves
• Instituição Sede: Escola Paulista de Medicina (EPM). Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus São Paulo. São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 22/03075-0 - Desvendando os mecanismos regulatórios envolvidos na relação parasito hospedeiro da Leishmania: foco nas alterações pós-transcricionais e pós-traducionais, AP.PNGP.PI
• Bolsa(s) vinculada(s): 23/13751-6 - Estudo do papel da acetiltransferase NAT10 na regulação da estrutura da cromatina e expressão gênica em Leishmania, BE.EP.MS
• Assunto(s): Acetilação Leishmania
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: acetilação | leishmania | Nat10 | Biologia Molecular de Leishmania

Resumo

Leishmania spp. é o agente etiológico das leishmanioses, um grupo de doenças que pode se manifestar de três formas principais: cutânea, mucocutânea e visceral. Durante seu ciclo de vida Leishmania spp. circula entre dois hospedeiros, um invertebrado e outro vertebrado, e durante a transição entre ambos precisa se adaptar as diferenças ambientais encontradas podendo utilizar de alterações da expressão gênica, tradução e metabolismo. A regulação da expressão gênica em Leishmania acontece pós-transcricionalmente, por mecanismos de estabilização dos mRNAs e regulação síntese proteica. Várias modificações pós-transcricionais já foram descritas para mRNAs, como por exemplo, metilação e pseudouridilação, que conjuntamente são chamadas de epitranscriptoma. Recentemente foi verificado que mRNAs podem também ser modificados por acetilação, modificação antes descrita somente para tRNAs e rRNAs, pela atividade da enzima N-acetiltransferase, NAT10. A acetilação de mRNAs ocorre em citidinas e é denominada N4-acetilcitidina (ac4C), e dependendo da região do mRNA que acontece pode promover aumento/diminuição da estabilidade dos mRNAs e/ou promover mudanças na eficiência da tradução da molécula. Considerando que regulação pós-transcricional é importante para Leishmania sp. e o papel que ac4C pode ter na regulação da vida útil dos mRNAs, neste projeto vamos estudar o papel da acetilação de mRNA neste parasita, através da caracterização bioquímica e funcional da proteína NAT10 em Leishmania mexicana. Neste sentido, iremos utilizar diferentes abordagens de biologia molecular e bioquímica para obter a proteína heteróloga NAT10 de L. mexicana para ensaios de atividade e iremos validar funcionalmente a função de NAT10 utilizando tanto modelo de Saccharomyces cerevisiae e de L. mexicana. Esperamos com este projeto contribuir para melhor entendimento dos mecanismos de regulação da expressão gênica de Leishmania e do papel da ac4C nos mRNAs.