Efeitos de diferentes agentes antioxidantes na produção/liberação de 6-nitrodopamina pela artéria umbilical humana in vitro

• Processo: 23/03460-4
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de abril de 2023
• Data de Término da vigência: 29 de junho de 2025
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Farmácia
• Pesquisador responsável: Gilberto de Nucci
• Beneficiário: Raquel Rios Campitelli
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências Médicas (FCM). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Campinas , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 19/16805-4 - Avaliação do papel fisiopatológico das catecolaminas endoteliais, AP.TEM
• Bolsa(s) vinculada(s): 24/03277-8 - Efeitos das novas catecolaminas na pressão arterial e ventilação em trutas arco-íris, BE.EP.IC
• Assunto(s): Farmacologia
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: catecolaminas endoteliais | cordão umbilical humano | 6-nitrodopamina | Farmacologia

Resumo

Introdução: Está bem estabelecido que as células endoteliais modulam a reatividade vascular através da liberação de mediadores como prostaciclina (Moncada et al., 1976), óxido nítrico (Furchgott e Zawadzki, 1980) e endotelina (Yanagisawa et al., 1988). As catecolaminas modulam o tônus vascular por meio das ações nos ±- e ²-adrenérgicos (Ahlquist, 1948); entretanto, a produção e a liberação de catecolaminas estão associadas à existência de terminais nervosos nos vasos (Kadowitz et al., 1976; Matsuyama et al., 1985).A atividade vasodilatadora da 6-nitrodopamina (6-ND) nos vasos do cordão umbilical humano é mediada pelo antagonismo seletivo do receptor D2 da dopamina (Britto-Júnior J, 2021). A produção/liberação endotelial de 6-ND é dependente da produção de NO. Aqui pretendemos caracterizar a participação de espécies reativas derivadas de oxigênio e nitrogênio (ROS e RNS, respectivamente), na produção/liberação de 6-ND pela artéria umbilical humana (HUA) in vitro.Métodos: Serão coletados pelo obstetra cordões umbilicais de 35 voluntárias normotensas, com idade 18 a 40 anos, sem medicação regular e sem pré-eclâmpsia, diabetes mellitus pré-gestacional ou gestacional, submetidas a parto natural ou cesariana. Só serão incluídos no estudo cordões provenientes de gestantes que consentirem por termo escrito em colaborar com o estudo. Imediatamente o tecido será colocado em solução de Krebs-Henselei e será mantido sob refrigeração até o transporte ao laboratório de estudos. Nele, será dissecada manualmente a artéria umbilical humana, que será mantida em cuba de órgãos com aquecimento e oxigenação constantes, e uma tensão de 10mN inicial será aplicada. Após estabilização, anéis pareados da mesma HUA serão incubadas, durante 30 min, isoladamente ou na presença de: superóxido dismutase (SOD; 250U/ml), catalase (1000U/ml), resveratrol (100M), ácido úrico (1mM), ebselen (100M), GSK2795039 (1M) ou GKT137831 (1M). Ao final do período de incubação, o sobrenadante será separado e armazenado a -20C até ser analisado por HPLC-MS/MS.