Descoberta e desenvolvimento de candidatos antivirais contra a protease NS2B-NS3pro de Zika Vírus

• Processo: 22/16111-5
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado Direto
• Vigência (Início): 01 de abril de 2023
• Vigência (Término): 31 de janeiro de 2027
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Biofísica - Biofísica Molecular
• Pesquisador responsável: Glaucius Oliva
• Beneficiário: Isabela Dolci
• Instituição Sede: Instituto de Física de São Carlos (IFSC). Universidade de São Paulo (USP). São Carlos , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 13/07600-3 - CIBFar - Centro de Inovação em Biodiversidade e Fármacos, AP.CEPID
• Assunto(s): Biologia celular Vírus Zika Infecções por Arbovirus Cristalografia Descoberta de drogas Ensaios enzimáticos Peptídeo hidrolases
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Arboviroses | Cristalografia | Descoberta de drogas | Ensaios Enzimáticos | protease | Zikv | Biologia Celular

Resumo

O Zika vírus (ZIKV) é um flavivírus transmitido pela picada do mosquito Aedes aegypti, responsável por surtos de febre Zika, que permanece com o potencial de gerar grandes impactos na saúde pública global. Em 2015/16, o vírus causou uma grande epidemia no Brasil, resultando em diversos casos de síndrome Zika congenital em fetos e recém-nascidos de mães infectadas e síndrome de Guillain-Barré em adultos. Apesar disto, o manejo do ZIKV é feito inteiramente pelo controle do mosquito vetor e tratamento dos sintomas, pois não existem fármacos ou vacinas disponíveis. Portanto, é fundamental a continuidade de esforços em busca de um tratamento eficaz e seguro. Um dos métodos mais eficientes de descoberta de novos antivirais é por meio de triagens de alto rendimento (high-throughput screening, HTS) de grandes bibliotecas de moléculas em busca de inibidores específicos, dentre os quais, as proteases virais são um importante alvo. O genoma do ZIKV é traduzido em uma única poliproteína, que é clivada pelo complexo proteolítico ZIKV NS2B-NS3 protease (NS2B-NS3pro) numa reação que pode ser reproduzida em laboratório por meio de ensaios enzimáticos baseados na clivagem de substratos fluorescentes. Neste projeto, será feita a expressão e purificação da protease recombinante de ZIKV para utilizá-la como alvo de triagens de grandes bibliotecas de moléculas e triagem de fragmentos. A inibição da enzima será validada em ensaios celulares com replicon subgenômico e aspectos da interação entre a protease e os ligantes serão elucidados por meio de ensaios cristalográficos. Com base no modo de ligação dos potenciais inibidores, serão propostas modificações estruturais para otimizar a potência antiviral e seletividade. O projeto está vinculado ao CEPID CIBFar da FAPESP (Processo 2013/07600-3) e será a continuação e aprofundamento do projeto de Iniciação Científica da candidata em busca de agentes anti-ZIKV (Processo FAPESP nº: 2021/01686-0). (AU)