Caracterização funcional de variantes raras em genes mitocondriais e inflamatórios identificados em pacientes portadores de CCC usando linhagens de células modificadas por CRISPR-Cas9

• Processo: 23/02141-2
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de maio de 2023
• Data de Término da vigência: 31 de março de 2024
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Imunologia - Imunologia Aplicada
• Pesquisador responsável: Edecio Cunha Neto
• Beneficiário: Rafael Pedro Madeira da Silva Souza
• Instituição Sede: Instituto do Coração Professor Euryclides de Jesus Zerbini (INCOR). Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina da USP (HCFMUSP). Secretaria da Saúde (São Paulo - Estado). São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 22/00758-0 - Mitocôndrias, interferon gama e genética na cardiopatia chagásica crônica: Patogenia, alvos terapêuticos e marcadores prognósticos, AP.TEM
• Assunto(s): Cardiomiopatia chagásica Doença de Chagas Genética Inflamação Mitocôndrias
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Cardiopatia chagásica crônica | CRISPR_Cas9 | Doença de Chagas | genética | Inflamação | Mitocôndrias | Imunopatologia da Cardiopatia chagásica crônica

Resumo

Cerca de 30% dos pacientes com doença de Chagas (DC) desenvolve cardiopatia chagásica crônica (CCC), uma cardiomiopatia inflamatória que ocorre décadas após a infecção inicial, enquanto que a maioria dos pacientes infectados (60%) permanece assintomática na forma indeterminada da doença (FI). Fibrose miocárdica, inflamação e disfunção mitocondrial estão envolvidas no substrato da arritmia e como eventos desencadeadores. A sobrevida na CCC é pior do que em outras cardiomiopatias. A CCC apresenta-se como uma miocardite rica em células T com IFN-gama e TNF-alfa abundantes, e com níveis seletivamente reduzidos de enzimas mitocondriais do metabolismo energético no coração. A sinalização pelo IFN-gama e TNF-alfa, constitutivamente afetadas em pacientes com DC, afeta negativamente a função mitocondrial. Um componente genético na susceptibilidade à doença foi sugerido por estudos de caso-controle que identificaram polimorfismos genéticos associados ao desenvolvimento da CCC. O sequenciamento do exoma completo em famílias nucleares com múltiplos casos de cardiopatia chagásica e forma indeterminada da doença identificou variantes patogênicas raras em genes mitocondriais e inflamatórios segregando-se com casos de CCC. Nós exploraremos a fisiopatologia das mitocôndrias e citocinas na CCC desenvolvendo estudos funcionais com linhagens de cardiomiócitos editadas com CRISPR-Cas9 portando ou não as variantes de interesse sob o efeito do IFN-gama e TNF-alfa.