Estudos bioquímicos da fosfatase DUSP12 em condições de estresse genotóxico: interações bimoleculares e atividade enzimática

• Processo: 22/10958-6
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado Direto
• Data de Início da vigência: 01 de maio de 2023
• Data de Término da vigência: 28 de fevereiro de 2027
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Genética - Mutagênese
• Pesquisador responsável: Fábio Luis Forti
• Beneficiário: Diana Reis Della Corte Guimarães Pacheco
• Instituição Sede: Instituto de Química (IQ). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Instabilidade genômica Proteína tirosina fosfatase não receptora tipo 12 Transdução de sinais Dano ao DNA Estresse oxidativo Atividade enzimática
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: dano e reparo de DNA | Dusp12 | Estresse Genotóxico e Oxidativo | Hp1Bp3 | Regulação de atividade Fosfatásica | sinalização celular | Instabilidade Genômica

Resumo

Proteínas tirosina fosfatases (PTPs) atuam desfosforilando resíduos de tirosina em diferentes biomoléculas e, posto isso, sua atividade regula o andamento de inúmeros processos celulares diferentes e fisiologicamente imprescindíveis. PTPs de especificidade dual (DUSPs) têm capacidade de desfosforilar resíduos de tirosina e treonina/serina, atuando assim numa maior variedade de substratos e, consequentemente, apresentando envolvimento em diversas enfermidades oriundas de uma regulação desajustada destas enzimas. Doenças neurodegenerativas, autoimunes e câncer dependem da participação de DUSPs, que se encontram superexpressas ou modificadas. Dentre essas enzimas, está a DUSP12 recentemente correlacionada a manifestações de hepatocarcinoma, leucemia mieloide crônica e osteossarcoma. Nosso grupo apontou a interação de DUSP12 com as proteínas HP1BP3 e NAT10, também envolvidas com processos celulares fundamentais como estabilidade genômica, transcrição de genes e citocinese, que podem trazer mais informações a respeito dos mecanismos envolvendo estas três proteínas e viabilizar novas estratégias para o tratamento farmacológico destes e outros distúrbios. A finalidade desse trabalho é investigar parâmetros cinéticos e estruturais da fosfatase dual atípica DUSP12 através de diferentes abordagens a fim de se identificar quais domínios dessa enzima têm maior influência sobre a sua atividade fosfatásica e se sofrem interferência de condições variadas de estresse. Com estas informações em mãos, posteriormente serão realizadas análises investigativas sobre a interação de DUSP12 com dois parceiros proteicos já identificados por espectrometria de massas (HP1BP3 e NAT10) através de ensaios envolvendo células tumorais em um contexto de estresse genotóxico. O sucesso destas investigações pode impactar diretamente no desenvolvimento de mecanismos de intervenção no estabelecimento e desenvolvimento do câncer através do uso terapêutico de drogas que atuam interferindo na atividade e/ou interações proteína-proteína de DUSP12. (AU)