Um novo modelo de camundongo transgênico CRISPR/Cas9 para estudos in vivo sobre a proteína espermática EPPIN, um alvo para contracepção masculina.

• Processo: 23/03529-4
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de maio de 2023
• Data de Término da vigência: 30 de abril de 2025
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Farmacologia - Farmacologia Bioquímica e Molecular
• Pesquisador responsável: Erick José Ramo da Silva
• Beneficiário: Célio Junior da Costa Fernandes
• Instituição Sede: Instituto de Biociências (IBB). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Botucatu. Botucatu , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 21/06718-7 - Estudo translacional sobre a proteína espermática EPPIN como alvo farmacológico para contracepção masculina, AP.JP2
• Assunto(s): Espermatozoides Fertilidade Motilidade espermática
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Contracepção Masculina | Espermatozóide | fertilidade | motilidade espermática | Farmacologia da Reprodução e da Contracepção

Resumo

Novas estratégias contraceptivas masculinas facilitarão a participação dos homens no planejamento familiar e compartilhamento da carga contraceptiva com as mulheres. A proteína espermática EPPIN é um alvo para o desenvolvimento de fármacos contraceptivos masculinos não-hormonais, de uso sob demanda, baseados na inibição da função do espermatozoide ejaculado. A relevância fisiológica da EPPIN é impulsionada por seu papel como um local de ligação para proteínas do plasma seminal, como a semenogelina-1 (SEMG1) humana e murina, levando à inibição transitória da motilidade e capacitação espermática. Embora os polimorfismos de nucleotídeo único no gene EPPIN humano tenham sido associados à infertilidade masculina idiopática devido a aberrações na motilidade espermática, pouco se sabe sobre sua necessidade para a reprodução in vivo em mamíferos. Dada a conservação funcional entre os ortólogos de EPPIN de camundongos e humanos, a geração de um modelo de camundongo transgênico fornecerá informações importantes sobre seus papéis na fertilidade masculina, ao mesmo tempo em que carrega o potencial para pesquisas clínicas sobre contracepção masculina. Nossa hipótese é que a deleção de EPPIN direcionada em camundongos causará infertilidade ou fenótipo de subfertilidade devido a aberrações espermáticas causadas pela ausência de interações proteína-proteína mediadas por EPPIN. Este projeto visa desenvolver um modelo de camundongo deficiente em EPPIN (EPPIN KO) usando a tecnologia CRISPR/Cas9 e determinar seu fenótipo reprodutivo, incluindo desempenho reprodutivo, níveis de hormônios sexuais, parâmetros quantitativos e funcionais do esperma e histologia testicular e epididimária. Este conhecimento irá expandir a compreensão atual da exigência de EPPIN para interações proteína-proteína que ditam a função espermática in vivo, contribuindo para a compreensão mecanicista da fisiologia espermática e como ferramentas para inovação terapêutica de fármacos contraceptivos masculinos.