Investigação comparativa funcional da biologia de Plasmodium spp. humano na medula óssea e sangue periférico

• Processo: 22/12894-5
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
• Vigência (Início): 01 de julho de 2023
• Vigência (Término): 30 de junho de 2025
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Parasitologia - Protozoologia de Parasitos
• Pesquisador responsável: Fabio Trindade Maranhão Costa
• Beneficiário: Jéssica Rafaela dos Santos Alves
• Instituição Sede: Instituto de Biologia (IB). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Campinas , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 17/18611-7 - Desenvolvimento de novas ferramentas para busca e validação de alvos moleculares para terapia contra Plasmodium vivax, AP.TEM
• Assunto(s): Malária Medula óssea Plasmodium Plasmodium vivax
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: malária | Medula Óssea | Plasmodium | Plasmodium vivax | Single-Cell RNASeq | Malária

Resumo

A malária é um importante problema de saúde pública em todo mundo. O Plasmodium, agente causador da malária, se reproduz assexualmente nos eritrócitos, e existe ainda um enriquecimento do parasito em nichos hematopoiéticos, como a medula óssea (MO) e baço, devido tropismo desses parasitos por reticulócitos imaturos que estão presentes nesse ambiente. Dados já publicados demonstram que esse enriquecimento na MO é importante para o desenvolvimento de gametócitos, e das formas assexuadas uma vez que dados recentes reforçam que a parasitemia periférica represente apenas uma fração da biomassa total do parasito, enquanto a maioria se acumula e se desenvolve na MO e no baço. Entretanto, os mecanismos envolvidos no tropismo celular desse parasito ainda não estão totalmente esclarecidos, e esse fato representa um gargalo importante no entendimento da biologia e patogênese da doença, e consequentemente no diagnóstico e tratamento da malária. No presente trabalho, hipotetizamos que existem diferenças fenotípicas e funcionais entre populações de parasitos que se desenvolvem em nichos hematopoiéticos, como a MO, daqueles encontrados em sangue periférico (SP). Para testar essa hipótese, propusemos combinar análises fenotípicas e funcionais para investigar e comparar a biologia de parasitos desenvolvendo em eritrócitos provenientes MO versus parasitos desenvolvendo em eritrócitos do SP. Para tal, amostras de aspirados de MO e SP de voluntários do Centro de Hematologia e Hemoterapia da UNICAMP recrutados durante avaliação de remissão para mielopatias e que não apresentam alterações hematológicas serão incluídas. Populações de reticulócitos provenientes desses tecidos serão isolados e caracterizados por esfregaço sanguíneo e citometria de fluxo. Posteriormente, as células serão usadas em ensaios funcionais, como ensaios de re-invasão, sensibilidade à droga, deformabilidade (aspiração em micropipeta), citoadesão em células endoteliais e rosetas, bem como análises transcricionais, como bulk RNA-seq e single-cell RNAseq. Espera-se com esse projeto, demonstrar as diferenças transcricionais e funcionais que contribuem para a seletividade celular nesse ambiente, contribuir para o melhor entendimento da infecção malárica nos tecidos hematopoiéticos, e cooperar para melhoria das estratégias para controle e eliminação da malária. Finalmente, é importante destacar que o projeto está sendo realizado em parceria com pesquisadores da Fundação de Medicina Tropical em Manaus e da Universidade de Glasgow, e que é financiado pela FAPESP e pelo Medical Research Council do Reino Unido. Ainda, as coletadas foram aprovadas nos devidos comitês de ética, permitindo a padronização de ensaios cruciais para a execução da proposta.